《分子生物学实验》之质粒提取
实验原理：
质粒抽提方法即去除RNA，将质粒与细菌基因组 DNA分开，去除蛋白质及其它杂质，以得到相对纯净的质粒。
实验试剂：
包含质粒的大肠杆菌菌液，质粒小提试剂盒（诺唯赞）。
实验步骤：
1.
实验前试剂准备
从培养箱中取出前一天摇的菌液，从中取2mL离心，去上清，备用。
溶液1在使用前加入RNA酶。
2.菌体裂解
根据试剂说明，向含有菌体沉淀的EP管中加入溶液1，震荡管底，使菌体全部溶解于溶液1中。
然后加入溶液2，温和地上下翻转EP管8-10次。
加入溶液3，立即剧烈翻转EP管8-10次，此时EP管中出现白色絮状沉淀。
3.过柱纯化
将EP管12000转离心1分钟，用枪头小心地吸出上清液至收集柱中。
12000转离心1分钟，弃去滤液，向收集管中加入500uL PW漂洗液，12000转离心1分钟，弃去滤液，重复加入500uL PW漂洗液，12000转离心1分钟，弃去滤液，12000转离心2分钟。
把收集柱装入新的EP管中，室温晾干5分钟。在收集柱的膜中加入50uL提取预热的EB buffer或去离子水。室温静置1分钟。12000转离心2分钟。得到质粒DNA溶液。
4.检测
提取完毕后，提取的样品进行琼脂糖凝胶电泳，对提取的质粒进行质量检测。在成像系统中成像，初步检测是否成功提取对应的基因片段。
注意事项：
1.DNA相关的实验，EP管和枪头等耗材要先进行高压蒸汽灭菌，去除DNA酶（无酶无菌耗材除外）。
2.加溶液2后需缓慢翻转EP管，然后立即加入溶液3，剧烈翻转。严格控制翻转的次数8-10次。
3.由于实验过程存在致癌试剂，实验操作人员严格穿戴实验服和手套。保障自身安全。
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