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抗体太烧脑?交给abinscience,一期一拆解!|抗体结构与抗原识别:从重链轻链到Fab/Fc功能

抗体太烧脑?交给abinscience,一期一拆解!|抗体结构与抗原识别:从重链轻链到Fab/Fc功能 艾必赛生物
2025-06-30
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导读:艾必赛知识问答第一期抗体结构与抗原识别:从重链轻链到Fab/Fc功能抗体是什么?


艾必赛知识问答第一期

抗体结构与抗原识别:从重链轻链到Fab/Fc功能

抗体是什么?

抗体(Antibody),又称免疫球蛋白(Immunoglobulin, Ig),是由B淋巴细胞分泌的一类高度特异性的蛋白质,能识别并中和外来病原体。它们广泛应用于科研、诊断与治疗开发中,是生命科学领域不可或缺的分子工具。

Fig.1.抗体结构示意图(图源DOI: 10.1007/978-3-319-42316-6_10)

抗体结构与分类可以为我详解一下吗?

抗体的基本结构呈“Y”字形,由两条重链(Heavy Chain, HC)和两条轻链(Light Chain, LC)通过二硫键连接形成。


重链(Heavy Chain)

  • 决定抗体的类别(isotype),即IgG、IgA、IgM、IgD、IgE。

  • 每条重链含有一个可变区(VH)和三个或四个恒定区(CH1、CH2、CH3/CH4)。

  • Fc区域主要由重链恒定区构成,介导免疫效应功能(如补体激活、Fc受体结合)。


重链亚型(以人源为例)


抗体类型

重链类型

IgG

γ链(gamma)

IgA

α链(alpha)

IgM

μ链(mu)

IgD

γ链(gamma)

IgE

ε链(epsilon)



轻链(Light Chain)

  • 分为κ链(kappa)和λ链(lambda)两种类型。

  • 每个抗体分子中,轻链类型要么全为κ,要么全为λ,不混合出现。

  • 每条轻链包含一个可变区(VL)和一个恒定区(CL),主要参与抗原识别。

轻链种类在不同物种中比例不同,如人类中κ链较常见,而鼠类中λ链比例更高。

Fab 与 Fc:抗体的功能模块

抗体可通过蛋白酶(如木瓜蛋白酶、肠激酶)酶切为两个主要功能片段:

  • Fab(Fragment antigen-binding):由轻链和重链的可变区构成,是抗原结合的功能区域。

  • Fc(Fragment crystallizable):由重链恒定区构成,负责与免疫系统成分(如Fc受体、补体蛋白)结合,触发免疫效应反应,如ADCC、CDC等。

抗体类型分类有哪些?

抗体依据重链恒定区的结构不同,分为五类,各具独特功能与分布:

类型

分子结构

功能特点

分布

IgG

单体

血清中最丰富,可穿胎盘,具中和和调理功能

血液、组织液

IgA

单体/二聚体

抗病毒、抗细菌,参与黏膜免疫

唾液、乳汁、泪液等

IgM

五聚体

初次免疫应答首发抗体,补体激活强

血液

IgD

单体

B细胞膜表面表达,功能不明确

B细胞表面

IgE

单体

与过敏反应、抗寄生虫免疫相关

组织粘膜,结合肥大细胞


Fig.2.五种抗体结构示意图(图源: ScienceDirect Topics, Immunoglobulin D Antibody - an overview)

抗原基础与分类

抗原是能被抗体或T细胞识别的分子,具有以下特性:

类型

定义

免疫原(Immunogen)

能引发免疫反应并被识别

抗原(Antigen)

可被识别但不一定激活免疫反应

半抗原(Hapten)

本身无免疫原性,需与大分子结合后激发反应

表位(Epitope)

抗体或T细胞实际识别的抗原决定簇


Fig.3.抗原与表位示意图(图源: Wild, D. (Ed.). (1996). Immunoassays: A practical approach. Oxford University Press)

实验抗体的选择有什么建议呢?

为了保证实验结果的可靠性,抗体选择需从以下几方面考虑:

  • 实验类型匹配:如WB、IHC、ICC、ELISA、流式细胞术(FACS)等,建议选用已在目标应用中验证的抗体。

  • 蛋白特性匹配:包括种属、修饰形式(磷酸化/乙酰化等)、蛋白定位(膜蛋白/核蛋白)等。

  • 验证策略可靠:优选经KO验证、互补验证、IP-WB验证等方式确认的高可信度抗体。

抗体来源及其应用差异


多克隆抗体(pAb)

  • 来源:将抗原免疫动物(如兔、羊等)后收集血清;

  • 特点:识别多个表位,适用于抗原低表达或变异样本。


单克隆抗体(mAb)

  • 来源:杂交瘤细胞系产生;

  • 特点:识别单一表位,批间一致性高,适合定量实验与机制研究。

抗体纯化方式与优化

实验级抗体通常需从上清或血清中纯化。常见纯化方式包括:

方法

原理

适用情境

Protein A

结合IgG Fc区

人IgG1/IgG2/IgG4

Protein G

覆盖更广Fc种类

鼠IgG、多物种

亲和层析

针对抗原特异识别

提升纯度与特异性

阴阳离子交换层析

基于电荷差异分离

特殊抗体分离需求

注意事项:选择Protein A/G时应参考抗体种属与亚型,以免影响结合效率或纯度。

提高特异性的方法:精细纯化不可忽视

高特异性抗体对于中和实验、阻断实验、流式多色共染至关重要。建议在制备阶段使用:

  • 严格的亲和纯化流程;

  • 分子筛除杂;

  • 低内毒素处理;

  • 严格验证的抗原源。

只有这样,才能确保抗体在关键实验中具备高信噪比、低背景的表现。


结语



从结构基础到功能分工,从抗原识别到抗体筛选与纯化,全面理解抗体的核心知识,将极大提升实验设计的合理性与数据的可重复性。建议科研工作者在实验初期就系统规划抗体选择与验证流程,为后续研究打下坚实基础。


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参考文献:

Díez, P., & Fuentes, M. (2016). Proteogenomics for the comprehensive analysis of human cellular and serum antibody repertoires. In *Advances in experimental medicine and biology* (Vol. 926, pp. 153-162). Springer. https://doi.org/10.1007/978-3-319-42316-6_10

Elsevier. (2025). *Immunoglobulin D Antibody - an overview*. ScienceDirect Topics. https://www.sciencedirect.com/topics/immunology-and-microbiology/immunoglobulin-d-antibody

Wild, D. (Ed.). (1996). *Immunoassays: A practical approach*. Oxford University Press.


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abinScience,2023年创立于法国。 专注于高质量生命科学试剂的开发与生产,立足法国斯特拉斯堡创新科技中心,以“Empowering Bioscience Discovery”为愿景,为全球科研人员提供创新型解决方案。
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