Protein A & G，不了解一下你就OUT了- 大数跨境

艾美捷

2019-10-11

对于IgG的纯化，大部分情况下我们都会选择使用Protein A或Protein G进行亲和层析。因为它们对于IgG的Fc段具有特异性的亲和作用，而对于其他杂蛋白没有或者只有很弱的结合。通常，仅仅凭借Protein A或Protein G一步亲和层析就可使蛋白纯度达到≥90%。

1、Protein A

蛋白A (Protein A) 来源于金黄色葡萄球菌的一个株系，它含有5个可以和抗体IgG分子的Fc段特异性结合的结构域。Protein A作为亲和配基被偶联到琼脂糖基质上，可以特异性的和样品中的抗体分子结合，而使其他杂蛋白流穿，具有极高的选择性。1个Protein A分子至少可以结合2个IgG。除了IgG，Protein A也可以结合另一些免疫球蛋白，如用于某些种属的IgA、IgM的纯化。重组Protein A的C-端新增一个Cysteine，可以单一位点定向偶联于琼脂糖基架上，降低与抗体接触的空间位阻。

2、Protein G

蛋白G(Protein G)是从G类链球菌（Streptococci）中分离出来的胞壁蛋白，分子量25kDa。相对于Protein A，Protein G对于大多数哺乳动物的IgG有着更高的亲和力，尤其是对于IgG的亚基，如人 IgG3，小鼠IgG1和鼠 IgG2a。因此，Protein G可用于纯化不能与Protein A很好结合的哺乳动物单抗和多抗IgG。

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