FastPrep-24™ 5G仪器是一种可以高速裂解生物学样本的台式匀浆仪,它可在40秒内同时匀浆多达24个样品。5G已经储存了70多个经过验证的程序,可通过触摸的方式在7英寸的高清显示屏上设置参数。

FastPrep-24™ 5G的运动方式独特,通过特殊材质的裂解介质全方位撞击样品,达到破碎细胞组织的目的。针对很难匀浆的样本,可以做到快速破碎匀浆几乎任何组织和细胞,且可以方便可重复地分离获得稳定的RNA,有活性的蛋白质和全长的基因组DNA。
关键词: 燕麦和燕麦半枝莲,气候变化,ESTs,根
研究目的: 为燕麦和燕麦半枝莲转录本的研究生成大量cDNA序列数据
应用: 通过Sanger测序和焦磷酸测序分析转录本
样品名称: 燕麦和燕麦半枝莲
样品类型: 根
材料:FastPrep-24™ 5G仪器
缓冲液: 改良的CTAB(十六烷基三甲基溴化铵)缓冲液:50ml0.1M硫酸铝铵和0.5ml苯酚:氯仿:异戊醇(25:24:1)
用改良的CTAB(十六烷基三甲基溴化铵)方法从200mg根中提取总RNA
1.在样品中加入0.5ml改良的CTAB缓冲液
2.用FastPrep-24™ 5G仪器以5.5m/s的速度裂解样品30秒
3.样品4°C,16,000g离心5分钟
4.用改良的CTAB缓冲液进行第二次提取
5.4°C,12,000g离心5分钟的上清液加入1ml分装的氯仿
6.在上清液中加入2倍体积含有30%聚乙二醇6,000的1.6M氯化钠溶液和1ml线性丙烯酰胺来沉淀核酸
7.随后RNA / DNA沉淀用60%预冷乙醇洗涤,并重悬在焦炭酸二乙酯(DEPC)处理过的水中
1.结果表明FastPrep-24™ 5G仪器提取方法能够得到用于测序的高质量的RNA
2.Sanger测序和焦磷酸测序联合应用,成功生成了大量的表达序列标签(ESTs)
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