科研的友友们，大家好呀！在探索抑郁症的神秘世界中，科学家们一直在寻找可靠的模型来模拟人类的抑郁状态，而大小鼠习得性无助实验无疑是靠谱的实验方式。如果你还在为此类实验步骤而焦虑，那么这篇文章就一定不要错过哟！
旷场实验：习得性无助实验是一种经典的动物行为学实验，它通过模拟不可控的厌恶刺激（如电击），观察动物在可逃避环境中逃避行为的欠缺，从而评估抑郁行为。当大鼠或小鼠接受连续的不可控电击后，它们会被放置在可以逃避电击的环境中，但往往会表现出逃避行为欠缺的现象，同时还伴有体重减轻、运动性活动减少、攻击性降低等行为改变。
这些表现与人类抑郁症的症状高度相似，因此该实验被认为是评价抑郁行为的一种理想方法，广泛应用于抑郁发病机制研究、新药研发以及军事医学等领域。
实验设备
学习无助箱由透明的（或者黑色）有机玻璃制成一个有盖的 30cm*30cm*40cm 的笼子，笼底由不锈钢栅（1.5 cm 间隔）制成，侧壁及顶盖上均有通气孔。笼底的不锈钢栅可通电流，电流由发放命令的控制盒控制，一般发放的电流强度为 0.8mA，持续 1-15s，每 1min 15s 给一次点击(电击持续时间和间隔时间均为随机性的)。
示意图：
（大小鼠学习无助测试箱）
实验步骤
<点击放大图片>
习得性无助实验主要分为模型建立期和条件性回避反应测试期。
模型建立期
实验当天，动物首先被放入测试箱（A室或B室）中适应5分钟。随后，动物在电击箱内接受30-60个运行周期的循环电击。每个运行周期包括无信号不可逃避的双室足底电击期和间歇期，电击时间为3-10秒，间歇期时间为3-10秒。电刺激频率为5-15Hz，刺激电流强度为大鼠0.65-1.80mA（推荐0.8mA），小鼠0.15-0.6mA（推荐0.25mA）。如果采用电压，大鼠应为65-70V，小鼠为30-36V。
条件性回避反应测试期
模型建立结束后第2天，进行条件性回避反应测试。动物被放入测试箱（A侧或B侧）中适应5分钟后，进行15-30个运行周期的实验。每个运行周期的总时间为30秒，包括3-10秒的条件刺激（灯光/声音）、3-10秒的条件刺激+非条件刺激（电击，条件同前）和5-25秒的间歇期（不给予任何刺激）。重复上述步骤连续2-3天。
评估指标
逃避失败次数
动物在设定的非条件刺激持续时间内未完成回避反应的总次数。逃避失败次数与动物的抑郁程度成正比。如果动物在30次电击中逃避失败次数大于25次，或者与对照组相比具有显著性增加（P<0.05），则可判断为抑郁行为。
逃避潜伏期
实验开始后，动物第1次穿梭至对侧测试箱的时间。逃避潜伏期与动物的抑郁程度成正比。如果逃避潜伏期大于15秒，或者与对照组相比具有显著性增加（P<0.05），则可判断为抑郁行为。
其他指标
除了上述主要指标外，主动回避次数、安全区时间（无电区域）、运动总时间（实验期间动物处于运动状态的时间）以及运动总路程（实验期间动物物理位移的总和）等也可作为抑郁行为的辅助评价指标。这些指标值越少，表明动物的抑郁程度越重。
（点击放大图片）
习得性无助范式是一种广泛使用的抑郁症模型，它基于动物在面对不可避免的厌恶刺激时，对新的可逃避压力源产生应对缺陷的观察结果。
在实验中，动物受到随机的轻微电击，无助的动物不会终止试验或逃脱，而是接受不可避免的压力源。
通过测试评分，包括逃避或终止失败的次数、在施加电击后逃避或终止试验的潜伏期、主动回避和被动回避反应等，可以全面评估动物的抑郁行为。
在未来的抑郁研究中，习得性无助实验将继续发挥其重要作用，助力科学家们解锁抑郁症的更多秘密，为人类的健康事业贡献力量。让我们期待在这一领域取得更多突破性的成果！
宝子们，今天的分享就到这里了，希望对大家有所帮助。
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