CAR-T产品是高度定制化的药物，其生产环节包括PBMC分离，T细胞分选、激活、基因改造、细胞扩增、清洗制剂、冻存等多个工艺步骤，复杂耗时。而process is product，所以工艺开发时需要投入大量物力人力来优化生产工艺，以获得最优细胞产品。整个环节细胞扩增最为耗时，涉及的条件也相当多，包括培养基，各种扩增试剂、因子，培养浓度、时间等。再逐一通过体外实验去进行产品评价，工作量是非常巨大的。IsoPlexis的单细胞功能蛋白质组学能够鉴定出群体细胞中真正发挥关键作用的多功能细胞亚群，并在多篇文献中被证实PSI能高效预测临床治疗结局，也被报导在细胞治疗产品研发和工艺优化阶段提供有意义的指导数据。
最近发表在blood上的一项研究评估了使用不同细胞因子扩增CD19CD20双特异性CAR-T用于治疗复发难治性非霍奇金瘤的I/II期临床试验。作者使用了IsoPlexis的单细胞功能蛋白质组学作为评估方法。
其中IL-2是公认的可促进T细胞增殖的细胞因子，但长时间的IL-2会影响T细胞分化，尤其是和CAR-T在体内持久性相关的记忆T细胞。IL-7+IL-15的组合被认为能显著提高CAR-T扩增速率，增强CAR-T在体内的持久性。该项研究的作者对比了使用IL-2扩增的CD19CD20双特异性CAR-T产品和使用IL-7+IL15扩增的CD19CD20双特异性CAR-T产品的区别，并对比了扩增时间8天和12天的区别。
结果显示使用IL-7+IL-15扩增的CD19CD20双特异性CAR-T中能分泌2种及以上细胞因子的多功能细胞的比例显著高于使用IL-2扩增的CD19CD20双特异性CAR-T，即使用IL-7+IL-15能扩增得到更多功能强大的CAR-T细胞；此外IL-7+IL-15扩增的CD19CD20双特异性CAR-T的PSI也显著高于使用IL-2扩增的CD19CD20双特异性CAR-T。其中使用IL-7+IL-15扩增组的CD4+ CAR-T细胞分泌的 IFN-y，Granzym B，MIP-1a，IP-10 及 IL-2 等和肿瘤杀伤相关的细胞因子显著高于IL-2扩增组；而使用IL-7+IL-15扩增组的CD8+ CAR-T细胞分泌的 Granzym B，IFN-y，TNF-a，MIP-1a，GM-CSF，IP-10及 IL-2等和肿瘤杀伤相关的细胞因子更是显著高于IL-2扩增组；
使用IL-7+IL-15扩增方案中，8个患者的细胞采用8天扩增时间方案，另外有6个病人采用12天扩增时间方案。结果显示，这两个不同扩增组的PSI相当，扩增8天组CD4+ CAR-T细胞分泌的perforin水平高于扩增12天的组；扩增8天组CD8+ CAR-T细胞分泌的MCP-1水平稍高于扩增12天的组，分泌IL-4的水平则低于扩增12天的组；
CAR-T产品的PSI在多个研究中被报导与临床结局有显著相关性。因此作者认为使用IL-7+IL-15扩增得到的CAR-T产品将比使用IL-2扩增得到的CAR-T产品更能有效持久地杀伤肿瘤，从而帮助病人获得更好临床结局。一项正在进行的前瞻性临床试验（NCT04186520）对使用IL-7+IL-15扩增得到的CAR-T产品疗效进行了评估。截至到目前，临床追踪结果显示使用IL-7+IL-15扩增得到的CAR-T产品在治疗难治性复发性非霍奇金淋巴瘤是安全有效的，ORR高，3级以上CRS和ICAN发生率低；使用8天扩增方案的病人在接受治疗后治疗效果优于使用12天扩增方案，两种方案在输注后早期的细胞表型检测上有差异；其中套细胞淋巴瘤的患者更是获得了100% ORR，且至今没有复发的情况。与作者的预期是非常一致的。
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应用IsoPlexis独特的单细胞功能蛋白检测技术能综合精准地表征细胞治疗产品的功能表型，为临床前产品质量属性和临床疗效提供可靠的生物标记物，从而帮助细胞治疗企业在目前竞争激烈的行业格局下加速研发，推动产品上市。
成立于2013年的IsoPlexis公司总部位于美国的康涅狄格州，是一家专注于单细胞多重功能蛋白质检测解决方案的领先供应商。自2018年商业化以来，已在全球成功装机超过200台，是众多国际知名研究机构和制药厂商的合作伙伴，相关文献发布超过100篇，并有多篇高分文章发布在Nature、Cell、Immunity等刊物上。
IsoPlexis致力于提供业内广受赞誉的精准单细胞分析系统，助力加速对抗癌症及各种疑难病症的进程。通过揭示细胞亚群中独特的免疫生物标志物，推动免疫疗法及靶向治疗迈向更精准、个性化的发展阶段。
