NK 扩增试剂盒谜团大揭秘，你想知道的都在这！

培养时间？

常规培养到 4L，一般 14~16天 即可；

若培养更大体积，需要持续补液，培养时间也相应延长到 18~20天，并应关注细胞增殖情况和活率。

培养体积？

脐血建议培养至 2~8L；

外周血建议培养至 2~4L。

收获数量，扩增倍数？

起始细胞数量为 2千万 时，脐血NK培养至 4L 可收获 150~200亿 左右的细胞，外周血NK培养至 2L 可收获约 80亿 细胞；

以 PBMC 里含有 10% 的 NK 计算，可扩增 6000~10000倍。

纯度？

CD3-CD56+ 表达率可高于 90%；

CD3-CD16+CD56+ 表达率可达 80%~90%。

Day3+发现比较明显的聚团现象，这个正常么，是否要干预？

NK细胞会特异性的结合首宁生物NK细胞扩增试剂并被激活，宏观看就是细胞聚团生长，正常现象，标志着激活成功。正常在 Day7 左右，这种聚团生长开始缓解，细胞以小团开始生长，整个过程中，不建议吹打细胞，每天补液即可。

基础培养基选用？

市面上常见的的淋巴细胞无血清培养基（如 CORNING 的 88-581-CM 等）。 

起始单核细胞接种量及接种密度？

常规培养 2~4L 体系推荐 1~2千万 起始；

若想培养更大体积，最多可以提高到 2.5千万。

需要考虑起始数量和滋养层比例关系，起始数量过高可能导致激活不充分，影响后续细胞纯度和扩增数量。

能否隔天补液？

需分情况讨论。

若细胞增殖较快，细胞数量每天能翻倍，需每天补液；

若增殖速度一般，密度未超过 2×10⁶/mL,可隔天补液。