幼龄动物试验（一）：交叉抚育操作程序及关注点

基于指导原则的要求，天勤生物开展了中药、化药等不同药物类别的儿科用药非临床安全研究，成功助力多个新药品种获得临床许可，积累了丰富的幼龄动物非临床试验经验，在大鼠、小鼠 、比格犬等常见动物种属中开展了多项安全药理学、毒代动力学、局部刺激等试验，拥有大量历史背景数据。

假定妊娠GD20开始分娩观察(每天3次)。分娩时间的确定通常有两种情况: 

上午的产程观察完成后，幼仔按性别逐个称重和临时性标记；通过性别和标记，区分原始窝出生的每只幼仔；将相关信息填写或输入到适当的表格中，包括在交叉抚育中应该排除的幼仔细节(如弱小的和畸形的幼仔等)，然后将幼仔归还给生母。此时，PND₁时准备交叉抚育的窝清单也即确定。将幼仔总数不足10个(包括雄性和雌性)及不支持交叉抚育设计(交叉抚育由4或5只雄性及4或5只雌性幼仔组成)的窝排除在研究之外，幼仔的体重也就趋向于一致(数量较少窝的幼仔通常比较大窝的幼仔重)。

制作交叉抚育的计划图表(图1)。记录出生窝的细节及可用于交叉抚育的幼仔，由另一人核实这些信息。选择幼仔并安排到虚拟的抚育窝中，生母窝中不保留剩余幼仔，每一个抚育窝中也没有同性别的兄弟姐妹。抚育窝中，虽然1雄1雌的兄弟姐妹是可以接受的，但是理想情况下不会有兄弟姐妹在同一个窝。使用前，交叉抚育计划表经另一人核实，由专题负责人确认。

图1  交叉抚育设计图示

每窝幼仔从原始居住笼移走，根据生母的编号和幼仔性别，放置在按性别标记的临时容器中。当所有适用的窝挑选好，则开始进行交叉抚育操作。

在抚育窝，使用带有抚育母鼠编号标记的分区盒（与图1中的划分类似），分区盒内有可标记幼仔编号的每个区分，根据交叉抚育窝计划表，选中的幼仔从出生窝的盒中移出，放置在抚育盒的适当位置。

一旦整个抚育窝构建成功，再次确认性别，并将其编号永久纹身，放置在抚育母鼠（养母）笼中。首先移出母鼠，将抚育的幼仔放在笼子里，将幼仔在窝内翻滚，以获得抚育母鼠和笼子的气味，然后抚育母鼠放回笼子里，这样交叉抚育的过程完成。