1.项目介绍
超临界流体色谱(Supercritical Fluid Chromatography, SFC) 是一种结合了气相色谱 (GC) 和液相色谱 (HPLC) 优点的高效分离分析技术。它以超临界状态的流体(最常用的是二氧化碳 CO₂)作为流动相,在较低温度下实现手性化合物、脂溶性分子等的快速、高效分离与纯化。SFC 在药物研发(尤其是手性药物分离)、天然产物分析、食品检测等领域展现出独特优势,被誉为绿色分离技术的重要代表。
2.基本原理
SFC 的核心在于使用超临界流体作为流动相。当物质(如CO₂)处于其临界温度和临界压力以上时,形成超临界态。此时,它兼具气体的高扩散系数、低粘度和液体的高溶解能力。样品组分在超临界流体流动相与固定相(色谱柱填料)之间进行分配,因分配系数的不同而实现分离。可通过调节压力(密度)和添加有机改性剂(如甲醇、乙醇)来灵活改变流动相的洗脱强度
3.主要应用
1.手性分离与纯化:SFC 是拆分手性化合物(对映体)的黄金标准,在药物发现与开发中至关重要。
2.天然产物分析:高效分离脂溶性天然活性成分(如萜类、生物碱、脂溶性维生素)。
3.药物杂质分析:检测复杂药物分子中的微量杂质。
4.食品分析:分析食品中的脂溶性成分、添加剂、农药残留、脂溶性毒素等。
5.聚合物添加剂分析:分析塑料等高分子材料中的抗氧化剂、增塑剂等添加剂。
6.环境分析:检测环境样品中的多环芳烃(PAHs) 等污染物。
7.制备纯化:结合制备色谱柱,用于毫克至千克级化合物的高纯度制备,效率远高于传统HPLC。
4.测试项目
1.常规手性分析与制备:提供对映体纯度分析及手性制备纯化方案。
2.脂溶性成分分析:用于复杂混合物中脂溶性目标物的定量/定性分析。
3.杂质谱分析:药物强制降解产物、杂质谱的研究。
4.方法开发与方法学验证:为客户定制化开发稳定、可靠的分析或制备方法。
5.SFC-MS 联用分析: 结合质谱提供结构确证信息。
5.样品要求
1.状态:推荐提供干燥固体或溶液(溶液需说明溶剂)。
2.溶剂:溶解样品的最佳溶剂是甲醇、乙醇、异丙醇、乙腈或丙酮等有机溶剂。水含量必须极低(最好<5%),水或缓冲盐可能堵塞管路或损坏仪器。
3.纯度:样品需具有一定纯度(初步纯化后更佳),避免过多杂质干扰结果。
4.浓度:分析用需提供~1 mg/mL溶液;制备用根据目标量提供更高浓度样品。
5.稳定性:样品在所选溶剂及环境条件下应稳定。
6.信息:提供样品基本信息(分子量、结构式或CAS号)及测试目的(分析/制备、手性拆分、目标物检测等)。
6.测试步骤
1.样品准备:将样品用合适的无水有机溶剂溶解至所需浓度,过滤。
2.系统准备:清洗系统,设定柱温箱温度(常为30-40°C),连接好色谱柱(通常使用手性柱或C18等反相柱)。
3.流动相设置:设定CO₂ 泵的压力(背压调节器,BPR)及流速(常用 1-5 mL/min),设定改性剂泵的比例(例如 5-50% 甲醇)。
4.方法优化:根据需要调整压力、改性剂比例、梯度程序等参数优化分离。
5.进样分析:将准备好的样品溶液注入进样阀。
6.数据采集:使用检测器(常用UV/PDA检测器,或与质谱MS联用)采集色谱图及数据。
7.后处理与报告:分析色谱数据,处理结果并出具报告(色谱图、保留时间、峰面积/积分结果等)。如为制备,则收集馏分、减压蒸干溶剂获得纯品。
7.注意事项
1.严格除水:样品与改性剂中的水必须尽可能少(<5%),否则会腐蚀设备、降低柱效或形成冰堵。
2.溶剂兼容性:确保溶剂与仪器(如密封圈)及检测器(如UV吸收)兼容。严禁强酸强碱。
3.样品稳定性:确认样品在CO₂ 体系及测试温度下稳定。某些不稳定化合物可能分解。
4.色谱柱选择:根据样品性质(如手性、极性)选择合适的色谱柱。
5.背压控制(BPR):保持稳定的背压对维持流动相超临界态和重现性至关重要,设定参数后避免频繁大幅调整。
6.CO₂安全:使用高压CO₂钢瓶需规范操作,防止泄漏。废液瓶收集废液需留有空间,CO₂ 释压可能导致瓶内压力升高。
7.制备纯化量大时需提前沟通:大制备量需考虑耗时、溶剂消耗和色谱柱耐受性
8.测试周期
① 常规样品平均测试周期:到样1~3天,无需加急。
② 特殊样品:以协商周期为准。
9.测试价格
一单一价
10.测试流程
完成之后根据科研检测服务人员提供的账号进入订单系统:http://customer.sainanecv.com
实时查询订单状态、数据下载、报销资料下载、争议数据复测等。、
服务微信:SNCS-666
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