一文读懂 xPONENT® 定量实验数据- 大数跨境

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一文读懂 xPONENT® 定量实验数据

路明克斯

2021-11-19

都说 xPONENT® 软件中设置好定量实验的参数后，实验读板结束便可一键生成检测报告，但是~~报告都看明白了吗？

标准曲线数据以及使用的拟合方式

在报告的第一页 "Formula" 栏位显示的即为设定的拟合方式；以下图为例，黄色亮显处为拟合公式（图例为五参数加权拟合）。

软件会根据设定的拟合方法，绘制标准曲线，以点呈现标准品数据，平滑曲线连接各个数据点。

报告中会有多个数据用以衡量曲线拟合程度，其中 R 的平方值是最常使用的判别标准，越接近 "1" 则曲线吻合程度越高；以下图为例，黄色亮显处为 R 平方值（图例 R 的平方值达到 3 个 9 ）。

外推法 Extrapolation

外推法又称外插法，当检测样本估计浓度已经超出标准品上下限，但仍在可计算范围内，则运用外推法对这些超出范围的数据点进行估算。

但是外推法估算出的值不一定能准确评估真实状况，特别在低于最低浓度标准品或高于最高浓度标准品时，曲线趋于水平，估算的效果会很差。因此，超过标准品上限浓度的样本，需要通过将样本稀释到标准曲线范围之内，以正确评估浓度；此外，能覆盖较大范围的标准曲线，在使用时也更加有效。藉由外推法计算的实验结果，在报告上会以 "Extrapolated" 进行注记。

报告解读

下图为实际报告中显示格式，以及各数据栏位代表的意义。

例一：标准品数据

Loc: 读板时的孔位
Standard: 标准品名称
Expected Conc: 在软件中设置的标准品浓度
Net MFI: 扣除背景孔后的荧光值
Test Result: 软件计算浓度结果
% Recovery: 回收率
% CV of Replicates: 重复性
Unit: 浓度单位
Comments: 其他注记

例二：样本数据

Loc: 读板时的孔位
Sample ID: 样本名称
Net MFI: 扣除背景孔后的荧光值
Test Result: 软件计算浓度结果
% Recovery: 回收率
% CV of Replicates: 重复性
Unit: 浓度单位
Dilution Factor: 稀释倍数
Comments: 其他注记

例三：样本数据

例三报告中，背景以及样本均为复孔实验，软件会自动计算平均值。

报告中怎么没有显示数值？

进行定量实验的小伙伴们可能会有这样的疑问，当超出定量检测标准品上下限的样本，在计算浓度时有时候会给出数值，但是有时候却只显示 ">标准品上限数值"，或是 "<标准品下限数值"，究竟是什么原因呢？为什么有时候不给结果，只出现 "NA"

以图四为例，黑色曲线是使用 5 个浓度标准品（Std 1~5，Std 1 为最低浓度，Std 5 为最高浓度），进行复孔检测绘制而成的标准曲线，而 Sample 1-6 为不同浓度的样本。其中黄色标记的样本（Sample 1 及 Sample 6）与标准曲线没有叠合，报告中将不显示数值，而绿色及红色标记的样本（Sample 2-5），则落在标准曲线上，报告中将会给出计算结果。