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本研究提供了一种全细胞催化制备环磷腺苷(cAMP)的方法,从cAMP生产菌株中克隆得到的腺苷酸环化酶基因,利用基因重组大肠杆菌实现在细胞水平催化生产cAMP,以三磷酸腺苷为原料,在镁离子、丙酮酸等物质条件下,加入表面活性剂增加细胞膜的通透性,利用重组大肠杆菌泥将三磷酸腺苷催化转化为cAMP,重组菌在全细胞催化过程中表现出良好的催化活性和稳定性,对底物三磷酸腺苷的转化率达到90%以上,反应体系简单、条件温和、周期短、副产物少。催化液再经陶瓷膜过滤除杂、超滤膜过滤除蛋白质及脱色、纳滤膜脱盐及浓缩、结晶和真空干燥,最终得到白色结晶性粉末样的高纯度cAMP成品。
该生产工艺操作简便、安全,转化率高,催化过程易于控制,反应体系中产物专一,不含有毒的原料试剂等杂质,非常有利于后续的分离纯化,而且大肠杆菌培养条件简单、周期短,可大大降低培养成本,是一条简单、快速、高效的生产途径,合适于工业化大生产。
分离工艺采用膜分离和等电点结晶相结合的技术,具有流程短,收率高,且产品的色泽好、纯度高。由于避免使用离子交换色谱技术,极大地降低了酸、碱的用量及废水排放量少,环境友好,并且降低了整个生产成本。
化学工程与技术领域。cAMP是有机体中广泛存在的一种具有生理活性的重要物质,在细胞内起到调节生理活动的重要作用,如细胞增殖与分化、激素的合成与分泌、膜蛋白活性、神经活动和基因表达等。cAMP在疾病治疗和肉畜食品方面中起着非常重要的作用。
合作方式:技术转移,产学研合作等。
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