xMAP 实验策略及优化：一道绿光照向你-报导基团

在 xMAP 仪器上，每检测完一孔，软件就能马上给出荧光数值，那么换种荧光试试行吗？显示的数值又是如何计算出来的呢？如果这些疑问也在你脑中飘过，这篇文章你肯定不能错过，快来文中找答案吧！

实验中经常使用的报导基团可以是荧光蛋白或是有机染料, 在 xMAP 的实验中亦然。

《荧光蛋白》

SAPE (Streptavidin Phycoerythrin)

这是一种由藻红荧光蛋白与链霉亲和素共价组成的荧光标记物, 因为具有亮度高、水溶性好的特性，是最常使用的报导基团，不只在 Cookbook 中推荐使用，在 Luminex 自己以及合作伙伴的商品化试剂中也都使用 SAPE 作为报告荧光。链霉亲和素对生物素具有强亲和力，使用生物素标记的核酸片段以及目标蛋白，可与 SAPE 结合形成复合物，在通过仪器的光学检测部件时被识别出来。

《有机染料》

除了 SAPE 之外，有机染料如 Alexa 532 以及 Cyanine 3 也可作为 xMAP 实验时的报告基团。一旦标记荧光染料的核酸探针或是蛋白与微球形成复合物，便可在通过仪器的光学部件时被检测到信号，有机染料虽然亮度不及 SAPE，但省去加入报告分子的步骤，且具有极佳的热稳定性，使其于实际应用上仍具优势。

相对报告荧光强度 ^[1]

你是否也好奇，在上样读板的过程中，仪器都记录了哪些数据，软件中能不能看到这些数据呢？ 

其实，当仪器采集样本时，对于能被仪器正确识别的微球，仪器会进行颗粒数量计算（Count）；而当记录微球上报导基团的 FI 值后，xPONENT 软件还可依据 FI 进行包括中值、均值、标准差、峰值、修剪值、甚至偏差值进行运算。

上述的这些数据，在 ”Statistic“ 处旁下拉选单，都可以依据需求显示。