肌钙蛋白I/T是临床上常用的心血管疾病诊断和预后评估标志物。肌钙蛋白I/T的检测方法较多,其中一种方法就是用碱性磷酸酶(ALP)标记的抗体与肌钙蛋白结合,之后加入底物,通过ALP的活性来反映肌钙蛋白的含量。比如,Coulter DxI 800 AccuTnI+3检测系统就是基于这样一个原理。
近日,加拿大临床化学家协会(CSCC)的官方杂志Clin Biochem刊登了一篇文章,指出Coulter DxI 800 AccuTnI+3容易受到内源性ALP的干扰,造成结果假阳性。研究者首先报道了一例61岁的女性肝硬化患者,由于该患者有胸痛症状,因此医生申请了肌钙蛋白I检测。
Coulter DxI 800 AccuTnI+3检测结果表明其肌钙蛋白I浓度为230ng/L(健康人群中99%分布范围上限为30ng/L)。重复检测一次后,肌钙蛋白I结果变成了160ng/L。由于结果不稳定(精密度太低),因此检验师将标本放到实验室另一台Coulter DxI 800 AccuTnI+3进行检测,发现结果变成了290ng/L。该标本外观正常,无脂血和溶血。
检验师怀疑可能有异嗜性抗体干扰检测结果,因此加入异嗜性抗体阻断试剂,结果发现肌钙蛋白水平变成了194ng/L,也没有明显下降。如果将标本放到Siemens Vista LOCI cTnI检测系统上进行检测,肌钙蛋白I浓度浓度变成了30ng/L(99%分布范围上线为22ng/L)。值得注意的是,Siemens Vista LOCI cTnI检测系统并不是通过ALP活性来判断肌钙蛋白浓度的。
考虑到患者的ALP浓度为3558U/L(参考范围:31-132U/L),检验师怀疑这可能是内源性ALP干扰了肌钙蛋白I检测。检验师对标本进行了稀释,结果表明,稀释后肌钙蛋白I水平与ALP基本呈线性(R2=0.93),而且,最为重要的是,当样本稀释后,检测结果更稳定了(精密度提高了)。
随后,检验师采用加热56度的方式灭活ALP,发现随着加热时间的改变,ALP活性降低,肌钙蛋白I的浓度也降低了47%。
假定ALP是内源性干扰物质的话,那么其它基于ALP的检测系统也会受到影响。因此检验师进一步研究了HCG是否会受到影响。在Coulter DxI 800系统上,该患者的HCG浓度为11IU/L(参考范围:0-8IU/L),但在Siemens Vista上,HCG检测结果却为1IU/L。 且与肌钙蛋白I一样,对样本检测后,HCG浓度也随着ALP活性的降低而降低。
作者将纯化的人ALP加到参考血浆中,发现随着参考血浆中ALP的浓度增高,肌钙蛋白I和HCG水平也逐渐增高。ALP活性每增加1000U/L,肌钙蛋白I浓度平均增高6ng/L。
最后,研究这分别用Coulter DxI800和Siemens Vista系统检测了以下三组人群的肌钙蛋白I水平:ALP正常的患者;ALP增高的患者;肝源性ALP增高的患者。结果发现,在ALP正常的患者中,Coulter DxI 800和Siemens Vista肌钙蛋白I检测结果较为一致;但在ALP增高的患者中,两套检测系统的结果并不是很一致,这种不一致在以肝源性ALP增高为主的患者中更为明显。
本研究结果表明,对于ALP增高(大于1000U/L)的患者,在采用CoulterDxI 800检测肌钙蛋白I水平时,应警惕内源性ALP的污染。
文摘链接:
http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/27317886
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