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植物学研究|快速测定植物中可溶性糖含量的方法改良

汉斯出版社

2024-02-02

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导读：

可溶性糖含量变化是植物响应逆境胁迫环境的重要指标之一，快速准确检测植物中可溶性糖含量的变化为植物抗逆性能研究提供了技术基础。传统分光光度法测定可溶性糖含量基于以前的实验室配置条件开展，存在测定繁琐和耗时长等问题。本研究基于目前实验室配置条件，分别从植物材料收集、破碎、测定等环节对传统测定方法进行改进，在保证了实验严谨性的前提下，有效提高了实验效率。方法验证结果显示，改进后方法的线性回归方程式为y = 1.2411x + 0.2236，线性相关系数为0.9993，检出限为7.1306 μg/mL，测定下限为28.5224 μg/mL，精密度RSD值小于2%，样品加标回收率为97%~103%之间，验证了改进后方法的可行性。方法应用结果显示，拟南芥和水稻幼苗在冷胁迫下可溶性糖含量均显著升高。改进后的分光光度法测定可溶性糖含量的方法快速准确，适合多个样品的同时测定，可作为可溶性糖含量测定的快速分析方法。

基本信息：

快速测定植物中可溶性糖含量的方法改良

Improved Method for Rapid Determination and Method Validation of Soluble Sugar Content in Plants

作者：

刘隽永, 郝文瑞, 齐昕, 许建飞, 赵凤云, 韩秀丽*：山东理工大学生命科学学院，山东淄博

关键词:

可溶性糖含量；分光光度法；方法验证；方法应用

项目基金：

国家自然科学基金青年项目(32000219)

山东省自然科学基金面上项目(ZR2020MC021)

原文链接：

https://doi.org/10.12677/BR.2024.131011

内容简介：

在汉斯出版社《植物学研究》期刊上，有论文结合当下实验室设备配置条件，对传统分光光度法测定可溶性糖含量的方法步骤进行了改进，主要包括植物材料的收集、破碎、提取、测定等几个步骤，并进一步对改进方法进行了方法验证和应用，验证了方法的可行性。

采用改进方法测定了拟南芥幼苗在冷胁迫适应过程中可溶性糖含量的变化，实验结果显示，4℃冷胁迫适应处理过程中，可溶性糖含量无显著变化(图 3)。进一步的−9.5℃冻胁迫处理结果显示，冻胁迫处理后，拟南芥幼苗中可溶性糖含量显著增加(图 3)。

可溶性糖含量测定的改良方法基于目前生理生化实验室基本配置开展，在保证了实验准确度的前提下，有效提高了实验效率，缩短了实验时间和成本，尤其针对对照组和处理组等多样品的同时测定。改良方法分别从方法的线性分析、检出限、测定下限、精密度，以及准确度等多个方面验证了方法的可行性。进一步拟南芥和水稻幼苗冷胁迫下可溶性糖含量的测定验证了改良方法的准确性和可行性。

改进方法主要参照本实验室的实验设备配置条件对传统方法进行了改进，各实验室在具体实施过程中，可依据本实验室条件对各步骤进行调整。材料收取和破碎环节，建议低温提取，避免此过程中糖苷酶活性引起的多糖降解过程，从而导致实验误差。提取过程，建议首先高温水浴提取，以使酶变性失活；同时为了避免水浴锅100℃水沸腾现象，以及1.5 mL Eppendorf离心管上部冷却回流空间不够的问题，建议95℃水浴提取；提取过程中如果没有配置超声提取设备，可调整为重复水浴提取。反应和测定环节中，由于反应时间不同，反应程度不同，测定数据会有所不同，因此对于标准曲线、对照组、处理组建议同时进行，此可避免实验误差。

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https://doi.org/10.12677/PI.2020.93015

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https://doi.org/10.12677/AAC.2018.83011

所属期刊

-Botanical Research-

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