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无需平板涂层的ELISA开发

无需平板涂层的ELISA开发 Expedeon
2019-09-25
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免疫测定是检测蛋白质和生物标记物的金标准方法。然而ELISA开发通常涉及昂贵的平板涂层、抗体对筛选,和耗时的开发和优化过程。且成功率不确定。


现在有了CaptSure™ DIY ELISA, 这些局限都不是问题了。CaptSure DIY ELISA 是最新的尖端 ELISA 试剂盒,内含抗体标记系统,可以使用任何抗体对,快速轻松地开发ELISA, 且无需平板涂层过程。此外,CaptSure DIY ELISA可以减少捕获抗体的用量, 可在同一平板上测定不同靶标,并可根据需求将ELISA简化为单洗涤模式。


CaptSure DIY ELISA 优化了 ELISA 实验步骤。加快了ELISA开发的速度,降低总体成本,提高检测灵活性,从而提高研究输出,降低错误率。



所以CaptSure DIY ELISA 的原理是什么呢?


CaptSure DIY ELISA 以 Expedeon 专有的 CaptSure 和 Lightning-Link® 技术为核心。


与一般 ELISA 不同之处,此试剂盒中包括即用型 CaptSure 平板,预先涂有我们的 CaptSure 抗体,该抗体特异于CaptSure 肽。试剂盒内的Lightning-Link CaptSure 可用于轻松快速地标记捕获抗体。一旦加入板中,CaptSure 抗体和CaptSure 肽之间的相互作用会将免疫复合物固定在板上。


同样,使用试剂盒中提供的 Lightning-Link HRP 偶联试剂可将检测抗体与 HRP偶联。因此,您可以以最少的动手时间标记好两种抗体,以保证得到最佳的 ELISA 结果。


Lightning-Link 是世界上最快的抗体标记技术,可以通过蛋白质或抗体上游离的胺基来对其进行标记。由于胺基普遍存在抗体中,因此任何抗体都可以用Lightning-Link CaptSure 肽和 Lightning-Link HRP 试剂盒标记。



标记过程包括以下几个简单的步骤:


  1. 用加入了修饰液的捕获/检测抗体溶液分别重悬冻干的Lightning-Link CaptSure肽和Lightning-Link HRP;

  2. 在室温下按指定时间孵育;

  3. 淬灭反应,标记的好的捕获和检测抗体即可用于ELISA。




CaptSure DIY ELISA 实验流程



利用CaptSure系统进行ELISA开发的流程可是多次洗涤或单次洗涤,具体取决于您的实验室设置以及所需的优化和自动化水平。


在多次洗涤形式中,操作流程与一般ELISA的相似(左下图)。但在事先对抗体浓度进行优化的情况下,实验可被简化为单洗涤形式(右下图)。



单次洗涤CaptSure ELISA的详图示如下所示。要使用单洗涤方案的ELISA,必须首先优化用CaptSure和HRP 标记好的抗体的浓度,以适应分析物的浓度。通常,抗体的终浓度约为100-200 ng / ml,每个平板孔中的终体积为100μl。


CaptSure DIY ELISA单次洗涤流程

  1. 分别为Lightning-Link CaptSure肽和Lightning-Link HRP标记您的捕获和检测抗体

  2. 将标记的抗体对和样品加入板中

  3. 孵育一小时

  4. 洗板、检测



 实验对比数据


CaptSure DIY ELISA和传统涂层方法进行了比较。使用CaptSure DIY ELISA,可使捕获抗体的用量减少10倍,而不会影响检测结果。


CaptSure DIY ELISA优化了ELISA实验步骤。加快了ELISA开发的速度,降低总体成本,提高检测灵活性,从而提高研究输出,降低错误率。



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与我们合作

Expedeon可为合作伙伴提供实验开发服务,包括CaptSure™ 实验开发、实验验证,以及全套的产品生产。


如需更多信息,请点击原文与我们联系,或发邮件至solutions@expedeon.com


【声明】内容源于网络
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Abcam 旗下公司。一流的生物试剂生产供应商。提供世界最快和最简单的抗体标记技术。产品涉及免疫学和蛋白质组学。
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