研究简介
本研究系统比较了两种超滤方法(CPS(CP-Select™) vs 离心超滤(Centricon® Plus-70))在废水SARS-CoV-2监测中的性能:
样本设计:22份废水样本(含6个污水处理厂)人工添加冠状病毒替代株MHV和噬菌体MS2,同时检测自然存在的SARS-CoV-2、腺病毒(HAdV)和JC多瘤病毒(JCPyV)。
核心发现:
人工病毒回收率:Centricon®对MHV回收率更高(24% vs CPS的7.5%),但MS2无差异(~27%)。
自然病毒检测:两种方法对SARS-CoV-2、HAdV、JCPyV的检出浓度无显著差异(p>0.05)。
操作性能:CPS浓缩因子更高(333倍 vs Centricon®的250倍),检测限更低(MHV LoD=6.19×10³ GC/L)。
生物安全:CPS设备可放入BSL-2生物安全柜,避免病原体泄露风险。
固体吸附损失:23%的SARS-CoV-2吸附于固体颗粒,预离心步骤导致病毒丢失。
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应 用
本研究通过对比**CPS快速富集系统(CP-Select™)**与离心超滤(Centricon®)在废水SARS-CoV-2浓缩中的性能,发现两种方法对自然病毒检出效果相当。CPS凭借其湿泡沫洗脱技术(Wet Foam Elution™),在80 mL废水样本中实现高达333倍的浓缩因子,并将MHV检测限降至6.19×10³ GC/L。
尽管人工添加的MHV回收率低于离心法,但CPS的生物安全兼容性(适配BSL-2实验室)和自动化流程为高风险病原体监测提供了更安全的解决方案。
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实 验 结 果
图1.两种超滤方法下MS2和MHV的平均回收率(%)
柱状图对比CP-Select™(n=22)和Centricon®(n=10)对MS2和MHV的回收效率。
MHV:Centricon®回收率显著更高(24.07% vs 7.51%,p=0.004)。
MS2:两者无差异(~27%),印证CPS对非包膜病毒的高效捕获能力。
图2.两种方法对自然存在的SARS-CoV-2(N1/N2)、HAdV和JCPyV的检出浓度(GC/L)
箱线图展示22份样本中四种病毒的浓度分布;
无统计学差异:所有病毒在两种方法间p>0.05,证明CPS在实际废水监测中与离心法等效。
灵敏度:CPS对SARS-CoV-2 N1基因的检出下限达1.0×10² GC/L,满足低浓度监测需求
图3.不同基质中MS2和MHV病毒颗粒的定量结果
对比直接检测病毒原液、废水添加后检测等四种策略的浓度差异;
基质效应:MHV在废水基质中定量值偏低,表明回收率计算受病毒保存载体影响。
CPS稳定性:不同基质下MS2在CPS中回收率稳定,凸显其对复杂样本的适应性。
图4 9份废水样本中SARS-CoV-2(N1)和MS2在固体颗粒与上清液的分布比例
堆叠柱状图展示病毒在离心后固体颗粒与上清液中的占比;
SARS-CoV-2:23%吸附于固体颗粒(上清液占77%),预离心步骤导致病毒损失。
CPS应对策略:直接处理上清液可规避固体吸附问题,但需权衡灵敏度与操作成本。
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结 论 与 展 望
本研究表明,CPS系统在废水中SARS-CoV-2监测领域展现出与传统离心超滤相当的灵敏度,且凭借333倍高浓缩因子、全自动湿泡沫洗脱技术及BSL-2兼容性,显著提升检测效率与操作安全性。尤其在高通量筛查场景(如废水流行病学)中,CPS的快速处理能力(单样本仅需数分钟)和低检测限(6.19×10³ GC/L)可实现对低载量病原体的精准捕获,为突发疫情预警提供关键技术支持。
未来,CPS的广泛微粒兼容性(病毒/细菌/真菌)与下游分析适配性(直接支持qPCR、测序等)将进一步拓展其在环境监测、食品安全及临床诊断等场景的应用潜力,推动微生物快速富集技术的标准化与智能化进程。
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