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“变塑为宝”新路径:微型反应器(RTS-8 PLUS)揭秘酵母如何将塑料单体转化为高值化学品

“变塑为宝”新路径:微型反应器(RTS-8 PLUS)揭秘酵母如何将塑料单体转化为高值化学品 达启科技
2025-12-25
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导读:本研究系统探究了产油酵母Rhodotorula toruloides代谢塑料单体乙二醇(EG)生成乙醇酸(GA)的能力及其在不同糖源(葡萄糖、木糖)存在下的生理学。

      本研究系统探究了产油酵母Rhodotorula toruloides代谢塑料单体乙二醇(EG)生成乙醇酸(GA)的能力及其在不同糖源(葡萄糖、木糖)存在下的生理学。研究发现,在葡萄糖存在下,EG在氮限制期被高效转化为GA,摩尔得率高达100%。在木糖存在下,EG的代谢不仅发生,还显著提高了菌株的最大比生长速率和木糖消耗速率,表明其可能缓解了木糖代谢固有的辅因子失衡问题。为了深入理解这些生理现象,研究团队在关键节点使用了RTS-8 plus多通道生物反应器。在初步摇瓶实验观察到EG存在下菌体生长可能受pH下降抑制后,研究人员利用RTS-8-PLUS在缓冲和非缓冲条件下重复了木糖+EG的培养实验。该设备提供的实时pH和溶解氧监测数据确凿地证明,在非缓冲条件下,EG代谢产酸导致pH急剧下降至2,严重抑制了生物量积累;而在缓冲条件下,pH保持稳定,EG的添加确实提高了比生长速率。此外,RTS-8-PLUS记录的溶解氧曲线帮助研究人员精确划分了指数生长期和氮限制期,为后续计算不同阶段的代谢速率提供了关键时间依据。 基于这些发现,研究者通过基因组尺度代谢模型分析,提出了R. toruloides中EG氧化的可能途径。该研究展示了R. toruloides在协同升级循环木质纤维素和PET废料方面的潜力。

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应用


该研究中,RTS-8-PLUS的核心价值在于作为一个“高精度、实时监测的微型生理学研究平台”。研究的核心目标之一是深入理解R. toruloides在不同碳源(尤其是木糖)存在下代谢EG的生理学响应。RTS-8-PLUS通过:

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提供关键机理洞察


实时监测的pH和溶氧数据直接证实了在非缓冲条件下,EG代谢产酸(GA)导致的pH急剧下降是抑制细胞生长的关键因素。这解释了摇瓶实验中观察到的现象,并指导了后续在缓冲体系中进行更准确的生理学研究。

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精确界定代谢阶段


溶氧的实时曲线帮助研究人员准确识别了指数生长期向氮限制期(Nlim)的转换点。这对于后续计算不同生长阶段EG消耗和GA生产的比速率、理解代谢转换的时机至关重要。

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增强数据可靠性


在受控的、可实时监测的环境中进行实验,排除了摇瓶实验中由于pH不受控等因素带来的干扰,使得关于EG能提高木糖利用速率的发现(在缓冲条件下)更加可靠和具有说服力。



实验结果



摇瓶中,葡萄糖存在下,有/无乙二醇(EG)时的发酵曲线。

该图展示了在摇瓶(非受控pH条件)中,R. toruloides在葡萄糖基础培养基中,添加或不添加EG时的生长和代谢曲线。结果显示,添加EG会导致最终OD降低,葡萄糖消耗变慢,且EG的消耗和GA的生产在指数生长期后(约24小时,推测进入氮限制期)才开始。这引出了关于pH抑制的假设。



葡萄糖存在下,EG代谢的定量生理学

该图展示了在受控生物反应器(pH控制)中进行的精确定量生理学实验数据。结果显示,在葡萄糖存在下,添加EG对菌体的比生长速率、生物量组成(脂质和蛋白质含量)没有显著影响,但实现了接近100%的EG到GA的摩尔转化得率。这证实了在pH受控条件下,EG代谢本身并不影响R. toruloides的核心生理,且其转化效率极高。



RTS-8Plus多通道生物反应器中存在乙二醇(EG)时,葡萄糖或木糖的发酵特性


结论与展望

研究证明产油酵母Rhodotorula toruloides能够将乙二醇(EG)高效转化为乙醇酸(GA),在葡萄糖存在下摩尔得率达到100%。首次发现EG代谢能改善木糖的利用,可能通过再生NAD(P)H缓解其代谢的辅因子失衡。EG不能作为唯一碳源支持生长,但可作为能量底物。

研究还通过计算机分析提出了EG氧化的可能代谢途径。RTS-8-PLUS在这一研究方向的延续中具有核心价值。作者指出,需要进一步的研究(如转录组学、蛋白质组学、代谢组学)来验证推测的代谢途径和基因功能。

RTS-8-PLUS在这一研究方向的深入探索中将继续发挥关键作用:

01

助力机理验证研究

在后续验证推测的EG氧化途径(如醇脱氢酶、醛脱氢酶)的功能时,可以利用RTS-8-PLUS并行培养野生型与多个基因敲除或过表达的工程菌株,在严格控制的相同条件下,实时监测它们对EG的消耗动力学、GA的产率以及生长表型的差异,快速筛选出关键基因。

02

优化协同发酵工艺

基于“EG改善木糖利用”这一发现,可以开发同时利用木质纤维素水解液(含葡萄糖、木糖)和PET水解液(含EG)生产微生物油脂和GA的协同工艺。RTS-8-PLUS可以用于快速筛选不同比例糖/EG混合物的最佳配比、C/N比以及诱导策略,以最大化油脂和GA的联合产量。

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支持组学样本制备

在进行转录组或蛋白质组学分析以揭示EG存在下的全局代谢响应时,需要确保培养条件的高度一致性和可重复性。RTS-8-PLUS的并行性和精确控制能力,使其成为获取处于相同生理阶段(如精确的指数中期或氮限制初期)的、生物学重复样本的理想工具,从而保证后续组学数据的质量。


RTS-8PLUS多通道生物反应器

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