SUNS 丨CD36基因多态性与汉族人群脑出血易感的相关性研究

【实验对象及方法】

1.实验对象

2014年10 - 2016年11月连续从重庆新桥医院招募的292例ICH患者作为病例组，所有患者均经脑CT扫描或磁共振成像（MRI ）结果被诊断为脑出血。同期从重庆新桥医院健康检查中心随机抽取298名参与者作为对照组。对照的入选标准是没有中风的症状或病史。记录的基本特征和血管危险因素，包括年龄、性别、身高、体重。吸烟者或饮酒者被定义为每年吸烟≥100支或饮酒量≥12次的参与者。

2.实验方法

2.1多态性选择和基因分型：根据功能相关性和HapMap数据库中的北京（CHB）基因型数据的次要等位基因频率选择SNP 。纳入标准如下：（1）HapMap数据库中所有符合条件的SNP次要等位基因频率> 0.05；（2）根据dbSNP数据库中SNP突变导致的氨基酸改变；（3）SNP位于一个单元型模块中并且处于完全连锁不平衡（r 2 > 0.8 ）。包括CD36基因的11种常见SNP。

2.2样本处理及数据分析：在ICH发生后24小时内收集ICH患者的静脉血。使用Wizard Genomic DNA Purification Kit提取基因组DNA，用改进的多连接酶检测反应（iMLDR）进行基因分型。数据分析使用GeneMapper软件4.0版进行。

3.统计学分析

统计分析使用SPSS 17.0软件进行。使用卡方检验确定Hardy-Weinberg平衡的存在，分类变量，使用卡方（测试χ 2）检验，对于连续变量，ICH组和对照组之间的所有比较均采用独立t检验，基因型组之间采用单因素方差分析，然后进行LSD检验和多重比较。ICH的患者和对照受试者的基因型和等位基因分布，使用卡方（χ 2）测试。采用多因素logistic回归分析不同遗传模型（加性，显性和隐性比较）指定受试者的基因型频率，并计算调整后的P值，优势比（OR）和95％置信区间（CI）协变量。统计学显着性设定为P <0.05。

【实验结果及分析】

ICH组的高血压患病率、饮酒史和家族史显着高于对照组，两组间差异有统计学意义，ICH患者的BMI值、TC、TG和LDL-C水平也略有升高。两组在性别、HDL、吸烟史、冠心病和糖尿病患病率方面无显着差异，所有11个SNPs的基因型与对照组的HWE一致。

调整年龄、性别、体重指数、高血压、冠心病、糖尿病、吸烟、饮酒习惯、TC、TG、HDL、LDL和中风家族史后进行Logistic回归分析，发现基因CD36的rs1194182位点突变和ICH之间存在显著关联，表明基因型GG是ICH相对于基因型GC-CC的危险因素，而ICH组和对照组rs1194182等位基因频率无显着性差异。

对CD36 SNP rs1194182进行的亚组分析显示，在高血压组，GG基因型分布和等位基因G频率ICH患者和对照组之间有显着差异。在非叶状ICH组中，我们发现GG分布的基因型与对照组相比有显著差异。在正常血压组、非叶状ICH组、男性组和女性组没有发现显著关联。不同亚组间rs1194182基因型分布，包括BMI，TC，TG，HDL和LDL，在不同的脂质组中没有发现显著差异，可能表明CD36增加ICH的风险并非通过血脂异常途径；高血压组CD36 rs1194182多态性与ICH显著相关，提示rs1194182多态性与ICH高血压之间存在显著相关性。因此，我们假设CD36通过血压途径产生ICH。研究中观察到其他10个SNP与ICH风险之间没有关联。

【实验结论】

首次报道了中国汉族人群中CD36和ICH SNP之间的关联，CD36中的SNP rs1194182可被识别为ICH的分子标记，特别是在高血压患者中，尽管机制尚不清楚。由于CD36和ICH单核苷酸多态性之间的关联已经在更大的样本量和更多样化的区域得到证实，我们可以根据静脉血样估计个体的ICH风险。