皮肤致敏性的替代试验主要有OECD于2010年发布的一系列小鼠局部淋巴结细胞试验(LLNA、LLNA:DA、LLNA:BrdU-ELISA), 2015年新增加了的两个体外方法﹣﹣体外致敏性KeratinoSens试验(KeratinoSense)和直接多肽反应试验 (dpra), 2016年又将人细胞系h-CLAT法、IL-8Luciferase法和Myeloidu937法汇总为同一个标准(OECD442E)发布。在体外检测方法出现以前,小鼠局部淋巴结试验(LLNA)是最为普遍使用的致敏性检测的替代方法,但其试验材料为小鼠的淋巴结细胞,因此该系列方法被认为是对传统动物实验的优化。

在科学家的不断努力下,已有很多关于过敏反应毒性机制的研究,2015年之后新增的检测方法均是基于过敏反应机制AOP途径中的关键事件检测开发的替代方法,经过验证后作为体外检测方法发布。此外,OECD于2019年发布了以流式细胞仪进行 检测的LLNA:BrdU-Flow Cytometry方法,作为LLNA:BrdU-ELISA方法的补充。2019年,我国《化妆品安全技术规范》中纳入了3项替代方法,分别是LLNA: DA、LLNA:BrdU-ELISA和DPRA。

国际上普遍认可的皮肤光毒性体外试验为3T3细胞中性红摄取试验(3T3 NRU),该方法也于2016年底纳入我国《化妆品安全技术规范》,作为化妆品用化学原料光毒性的体外检测方法。除此之外,JaCVAM还发布了2个试验方法:活性氧试验(ROS)和酵母红细胞试验(Yeast-RBC),其中活性氧试验(ROS)于 2019年收录于OECD的指南中。目前,还没有其他国家和地区验证或发布酵母红 细胞试验。
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