1. 菌体裂解以后，杂质过多，过滤容易造成堵塞，如何进行解决？
可以对过滤膜进行筛选，选择孔径大些的膜进行初步过滤再接二级膜过滤；也可以在裂解后先进行沉淀去除大颗粒等杂质再过滤。
2. RNA应该如何冻干保存？
需要对RNA的制剂进行开发筛选，使RNA在冻干过程中能有好的稳定性，然后对冻干工艺进行开发和优化。
3. 质粒原液的分装和储存需要考虑哪些因素？
针对质粒原液分装储存，通常在最终生产的时候，储存用的材质一定要与分装稳定性产品的材质保持一致，另外一个考虑要素是装量，按照法规要求，通常是要装到 2/3 以上的体积，储存在-70度保存。
4. 针对自复制RNA，浓度检测偏高的问题应该如何解决？
浓度检测通常使用UV方法，但UV法会因盐、溶剂、洗涤剂、蛋白质以及游离核苷酸等污染物的影响而导致检测浓度偏高。针对这种情况，可以考虑荧光方法，该方法使用靶标选择性染料，只有与 DNA 、RNA 或蛋白质靶结合时才会发射荧光。它们比传统的紫外吸光法更准确，灵敏度也更高。
5. 在加帽率检测案例中，HPLC图谱中加帽片段与探针片段实现分离的原理是什么？
主要有两方面的原因：首先加帽片段和探针片段长度是有一定的差异的，其次二者序列碱基组成也是有差异的，因此二者在色谱柱上的保留行为不同，从而实现分离。
6. 在体外转录中用到的除T7之外的酶法规未要求检测，实际生产中一般会检测吗？用什么方法检测？
虽然法规没有相关规定，但实际生产中会通过BCA检测残留总蛋白的方法进行检测
7. mRNA体外转录用到的酶是否需要检测残留，用什么方法检测？
mRNA体外转录酶需要检测，通常用ELISA方法
8. mRNA的完整性是用什么方法和设备检测？能达到什么样的质量标准？
更加详细的内容尽在线上课程【稳定生产，mRNA体外合成要点】，扫描下方二维码回看课程。
