大数跨境
0
0

蛋白刺客:FectoPRO® 可线性放大的高效蛋白生产

蛋白刺客:FectoPRO® 可线性放大的高效蛋白生产 Polyplus转染专家
2023-02-21
0
导读:优质的转染试剂是通往优质蛋白生产瞬转平台的必经之路。

重组蛋白的制造是当今制药工业中用于生产复杂治疗剂的非常重要的领域。其中,瞬时蛋白质生产能够快速有效地生产毫克至克重量的重组蛋白质,与开发用于生物生产的遗传稳定细胞系相比,这节省了时间和成本,也成为了很多研究者比较关注的方向。


瞬时基因表达(TGE)通常用于中等规模的重组蛋白和抗体的生产。这种方法可以支持产生足够数量的蛋白质,而无需在“概念证明”研究或工具验证之前投资生产稳定的细胞系。该工艺的速度和灵活性使TGE在生物生产中广泛采用,用于早期发现、研究应用和工艺开发。


哺乳动物瞬转系统可以实现快速且优质的蛋白生产,一般在合适的系统中1-2周就可产生大量的用于研究的蛋白,常用的2种细胞系类型包括CHO细胞及HEK-293细胞。然而,研究者在利用瞬时转染生产重组蛋白时,通常会遇到蛋白表达量极低,成本高昂且操作复杂不利于放大生产等问题。


优质的转染试剂是通往优质蛋白生产瞬转平台的必经之路。FectoPRO®试剂是根据转染效率、蛋白产量和细胞活力等,对多种化学结构进行广泛筛选设计,专用于瞬转系统的转染试剂。


FectoPRO®符合生物制造准则,产品不含动物源性成分,并限定化学成分,对每批生产都进行系统的批次管理和发布测试。此外,FectoPRO®转染试剂盒还经过先进的质量控制:蛋白质生产能力、细胞活性和完全无菌。Polyplus自2002年起通过ISO 9001质量管理体系认证,该认证等级向全球客户保证通过该等级认证的供应商能够提供可靠而有效的产品开发、制造、销售及客户支持。



操作便利

FectoPRO®转染试剂是一款较为开放的瞬转试剂,可适用于各种CHO细胞及HEK-293细胞及其衍生细胞的瞬转表达系统。FectoPRO®转染试剂对于复合物培养基的兼容性也更高,除了传统常规用于做转染的无血清培养基Opti-MEM之外,也兼容其他类型的无血清培养基,如DMEM培养基,RPMI-1640培养基等基础培养基。


图1. FectoPRO®转染实验操作简图

极高的转染效率

高品质的转染试剂是瞬转蛋白表达系统的关键,FectoPRO®转染试剂在多种悬浮CHO, HEK-293细胞中表现出极高的转染效率。下图是分别利用FectoPRO®转染试剂成功转染 CHO-K1和HEK-23F细胞的数据。可以明显看到,跟其他转染试剂对比,FectoPRO®转染试剂表现出最佳的转染效率。


图2. 与PEI和FreeStyleTM Max转染试剂相比,FectoPRO®在CHO-K1细胞中表现出更高的转染效率

图3. 与FreeStyleTM Max, TransIT-PRO及PEI转染试剂相比,FectoPRO®在HEK-293F细胞中表现出更高的转染效率


高蛋白产量

优异的蛋白产量通常是研究者在瞬转蛋白生产中首要考量的要点,与表达细胞,递送分子,表达培养基等一样,优异的转染试剂往往在早期的瞬转中就能体现出来。下图是通过对比不同品牌转染试剂分别在CHO-S细胞和HEK-293F细胞中蛋白产量的数据,经过5天左右的表达,FectoPRO®转染试剂对应的蛋白产量均高于其他品牌转染试剂的蛋白产量。


图4. 与FreeStyleTM MAX和PEI转染试剂相比,FectoPRO®转染试剂CHO-S细胞上使用更低的DNA用量,且获得更显著的鼠IgG表达


图5.与FreeStyleTM Max 和TransIT对手相比,在HEK-293F细胞中使用FectoPRO®时,蛋白产量可提高2-3倍


培养基兼容性高

FectoPRO®兼容各种配方的瞬转培养基,能够更大程度的给研究者带来操作方面的使用性和便利性,无需花费大量的精力和成本筛选培养基,从而加快研究进展。

图6. FectoPRO®转染试剂可兼容多款商业化的培养基,且具有高表达效率


易于体系放大

FectoPRO®可适用于各种培养容器,如深孔板,摇瓶,TPP反应器,培养袋,生物反应器等。良好的产品性能和稳健性使得FectoPRO®支持从几十毫升到数升的细胞培养可以做到线性缩放,无需做更多的方案优化调整。


图7. 在CHO-S细胞和HEK-293细胞的瞬转体系中,FectoPRO®转染试剂可轻松实现线性等比例放大生产




Polyplus公司介绍

Polyplus-transfection®是一家专业的生物技术公司,专注于为生命科学研究、体内转染、生物制品制造以及细胞和基因治疗的客户提供创新的核酸递送解决方案。Polyplus-transfection®拥有近20年的转染经验,所开发的转染试剂可满足处于各个阶段的客户,从初期的工艺流程开发,到临床前研究以及临床试验以及商业化。


联系方式

如果您有任何问题都可以通过以下途径和我们联系

Email: China@polyplus-transfection.com 

Tel: 021-62267702 








加速细胞和基因治疗的开发

Polyplus-transfection®提供GMP级转染试剂


病毒载体的生产是细胞和基因治疗产品生产过程中一个重要的环节,稳健的瞬时转染是保证高产量和可靠的病毒载体大规模商业化生产的关键。Polyplus-transfection®提供GMP级转染试剂,可用于临床病毒载体的生产。


Polyplus-transfection®是一家面向基因和细胞治疗市场的GMP级转染试剂供应商,提供一系列基于PEI的高品质转染试剂。公司开发的用于基因治疗和细胞治疗领域的病毒载体生产试剂PEIpro®系列产品已经越来越广泛的应用到了众多的临床试验中并成为了行业的金标准。其中PEIpro®-GMP是符合最高质量等级标准的PEI,是目前市面上第一款完全GMP级转染试剂,


PEI的生产遵循非常严格的质量控制和法律法规,有三个质量等级:研发级的PEIpro®用于工艺开发,更好质量等级的PEIpro®-HQ用于临床前研究和早期临床试验,最高质量等级即完全GMP级别的PEIpro®-GMP可用于临床病毒载体的生产(包括慢病毒,腺病毒,腺相关病毒等),满足细胞治疗和基因治疗的质量和监管要求。


专为悬浮体系生产AAV开发 FectoVIR®-AAV

FectoVIR® -AAV是公司最新研发的一种基于化学成分且不含动物源的阳离子纳米技术的转染试剂,专为悬浮细胞体系规模化生产AAV而开发,用于基因和细胞治疗领域。FectoVIR®-AAV具有显著高于同类产品的rAAV产量,在工艺便利上更是有突出优势,如减少了操作体积低至1%、并提高了复合物的稳定性(长达6小时),易于转染复合物的转移和工艺放大。FectoVIR® -AAV适用于各种规格的摇瓶、转瓶、细胞培养袋和生物反应器中无血清悬浮培养的DNA转染,且兼容在细胞培养过程中抗生素的使用。GMP级FectoVIR® -AAV已经上市。


与PEIpro®和其他竞争对手相比,FectoVIR-AAV® 在悬浮细胞中能生产更高滴度的rAAV病毒载体。与其他竞争对手(PEImax)相比,FectoVIR-AAV®可重复性地大幅提高 AAV 产量,可高达10 倍(Fig. 1)。


Fig 1. 和竞争者相比,FectoVIR®-AAV 可提高rAAV-2-GFP的滴度(functional title)达10倍。按厂家推荐条件进行转染,72小时后收取病毒。


扫描二维码添加Polyplus官方微信或者公众号搜索Polyplus 转染专家获取更多丰富的转染知识和产品信息!

【声明】内容源于网络
0
0
Polyplus转染专家
Polyplus是一家专注于为科学研究、生物制品以及细胞和基因治疗生产提供上游工艺解决方案的生物技术公司。超过20年创新的核酸转染经验,polyplus上游解决方案专为满足从科学研究到临床开发而定制,遵循严格的科学规范和监管要求。
内容 114
粉丝 0
Polyplus转染专家 Polyplus是一家专注于为科学研究、生物制品以及细胞和基因治疗生产提供上游工艺解决方案的生物技术公司。超过20年创新的核酸转染经验,polyplus上游解决方案专为满足从科学研究到临床开发而定制,遵循严格的科学规范和监管要求。
总阅读6
粉丝0
内容114