大数跨境
首页
>
低至10pM的siRNA 基因沉默 基于阳离子聚合物
>
0
0

低至10pM的siRNA 基因沉默 基于阳离子聚合物

低至10pM的siRNA 基因沉默 基于阳离子聚合物 Polyplus转染专家
2023-03-07
0
基因沉默是基因表达调控的一种重要方式。siRNA可以介导特定基因的表达抑制。Polyplus的转染试剂INTERFERin® 非常适用于RNA干扰试验，使用极低浓度的siRNA达到高效的基因沉默，确保可靠的试验结果。
  • 用量：低至
    1nM
    siRNA  减少脱靶效应
  • 沉默效率：在多种细胞系中沉默效率超过
    90%

  • 毒性小：质粒和转染试剂用量小 极佳的细胞活率
  • 应用场景：siRNA, miRNA and other oligonucleotides. 仅用于miRNA转染的文献就超过1000篇




INTERFERin®
更少的siRNA，更少的脱靶效应
一些文献表明转染低浓度的siRNA能够避免脱靶效应。确实，当转染高浓度siRNA时，会观察到这些非特异性的副作用。因此通过使用尽可能少的siRNA可以提高实验数据的可靠性。INTERFERin®专为此而设计：使用低浓度siRNA达到高效率基因沉默。

使用INTERFERin®递送1 nM siRNA 就可以达到具有选择性的高效基因沉默，而竞争产品需要至少10 nM siRNA来达到50%的基因沉默 (Fig. 1)。

Fig. 1: INTERFERin® 仅需要1 nM siRNA达到有效的基因沉默
更加令人惊叹的是, 使用10 pM siRNA 依然能达到50%的沉默效率 (Fig. 2)。

Fig. 2. INTERFERin®在极低的 siRNA 浓度下也能达到高效基因沉默。A549-GL3Luc cells 在有血清的条件下使用INTERFERin® 转染浓度逐步降低的 anti-Luc siRNA. 48小时后检测Luciferase的表达. control siRNA没有观察到抑制效果
使用INTERFERin® 转染1 nM anti-lamin A/C siRNA可以显著降低lamin 的基因表达至几乎检测不到的水平 (Fig. 3)。

Fig. 3: 使用INTERFERin® 转染1 nM siRNA达到高效和特异性基因沉默
沉默效率超过90%
对多数贴壁细胞或原代细胞，1 nM siRNA能够达到超过90%的基因沉默。对于悬浮细胞，使用5 nM siRNA依然能达到80%的沉默效率。

Table 1: 成功使用INTERFERin®达到高效基因沉默的细胞系
极佳的细胞活率
在保持细胞活率方面，INTERFERin®优于其他转染试剂。在转染1 nM siRNA48小时后, 使用INTERFERin®的细胞很健康, 而使用reagent S 的细胞可以观察到明显的细胞毒性(Fig. 4)。

Fig. 4: INTERFERin®对细胞及其温和，在siRNA转染48小时后能够维持良好的细胞形态，相比其他竞争者的试剂.
简单即用的标准操作说明书
  • 1nM的起始用量在大多数细胞中可达到有效的基因沉默
  • 兼容血清、抗生素，转染前后无需换液

应用：miRNA转染  1nM? 10pM? siRNA高效基因沉默 更少用量 更少脱靶效应


这么优秀的转染试剂，它的原理是什么

这是基于PEI的化学转染方式





阳离子聚合物PEI
PEI：Polyethylenimine (聚乙烯亚胺)
由著名化学家Dr. Jean-Paul Beh发明并申请了专利，他和他的团队基于这个专利创立了Polyplus公司，

PEI是如何把核酸递送到细胞内的？


PEI带正电，可以包裹带负电荷的核酸，形成核酸-聚合物的复合物，在静电作用下贴附在细胞膜上，然后通过内吞作用进入细胞。随后经质子海绵作用，内涵体在细胞质中释放DNA。当有丝分裂过程中核膜消失时，质粒大多到达细胞核。PEI转染对细胞的毒性更小，因为不会改变膜的通透性，能够维持细胞良好的状态。通过在大量细胞上的验证，PEI具有卓越的转染效率。

除了转染效率高，细胞活率高，PEI用作转染试剂还有更多的优点
1）可以兼容血清和抗生素，转染前后不用换液
2）操作更加便捷
3) 经济高效，质粒用量和转染试剂用量小


说到这里，就要给大家介绍我们最知名的产品jetPRIME®



jetPRIME®高效转染试剂 基于阳离子聚合物
jetPRIME®是通用型DNA/siRNA转染试剂，可用于DNA转染，siRNA转染以及DNA/siRNA的共转染，基因编辑以及小规模的病毒生产。

更高效的转染效率 比脂质体转染效率更高

根据说明书推荐步骤转染，GFP质粒转染后24小时FACS结果


操作步骤简单，可以兼容血清和抗生素，转染前后不用换液


性价比高 质粒用量和转染试剂用量小


参考文献
已经有超过2000篇文献使用了jetPRIME®
登录www.poluplus-transfection.com首页，查看转染数据库搜索相关数据
根据细胞类型，转染核酸分子，转染试剂及其他进行搜寻


在不同细胞系中使用jetPRIME®的转染效率
同样，您也可以在我们的数据库中查询更多的数据。


Polyplus公司介绍

Polyplus-transfection®是一家专业的生物技术公司，专注于为生命科学研究、体内转染、生物制品制造以及细胞和基因治疗的客户提供创新的核酸递送解决方案。Polyplus-transfection®拥有近20年的转染经验，所开发的转染试剂可满足处于各个阶段的客户，从初期的工艺流程开发，到临床前研究以及临床试验以及商业化。


联系方式
如果您想了解更多我们的产品可以浏览我们的网站www.polyplus-transfection.com
或有任何问题都可以通过以下途径和我们联系
Email: China@polyplus-transfection.com
Tel: 021-62267702
或关注公众号，点击服务，选择技术咨询，填写完成，技术人员会尽快联系您。

‍

‍
点击下方阅读原文，也可直接联系Polyplus








加速细胞和基因治疗的开发

Polyplus-transfection®提供GMP级转染试剂


病毒载体的生产是细胞和基因治疗产品生产过程中一个重要的环节，稳健的瞬时转染是保证高产量和可靠的病毒载体大规模商业化生产的关键。Polyplus-transfection®提供GMP级转染试剂，可用于临床病毒载体的生产。


Polyplus-transfection®是一家面向基因和细胞治疗市场的GMP级转染试剂供应商，提供一系列基于PEI的高品质转染试剂。公司开发的用于基因治疗和细胞治疗领域的病毒载体生产试剂PEIpro®系列产品已经越来越广泛的应用到了众多的临床试验中并成为了行业的金标准。其中PEIpro®-GMP是符合最高质量等级标准的PEI，是目前市面上第一款完全GMP级转染试剂，


PEI的生产遵循非常严格的质量控制和法律法规，有三个质量等级：研发级的PEIpro®用于工艺开发，更好质量等级的PEIpro®-HQ用于临床前研究和早期临床试验，最高质量等级即完全GMP级别的PEIpro®-GMP可用于临床病毒载体的生产（包括慢病毒，腺病毒，腺相关病毒等），满足细胞治疗和基因治疗的质量和监管要求。


专为悬浮体系生产AAV开发 FectoVIR®-AAV

FectoVIR® -AAV是公司最新研发的一种基于化学成分且不含动物源的阳离子纳米技术的转染试剂，专为悬浮细胞体系规模化生产AAV而开发，用于基因和细胞治疗领域。FectoVIR®-AAV具有显著高于同类产品的rAAV产量，在工艺便利上更是有突出优势，如减少了操作体积低至1%、并提高了复合物的稳定性（长达6小时），易于转染复合物的转移和工艺放大。FectoVIR® -AAV适用于各种规格的摇瓶、转瓶、细胞培养袋和生物反应器中无血清悬浮培养的DNA转染，且兼容在细胞培养过程中抗生素的使用。GMP级FectoVIR® -AAV已经上市。


与PEIpro®和其他竞争对手相比，FectoVIR-AAV® 在悬浮细胞中能生产更高滴度的rAAV病毒载体。与其他竞争对手(PEImax)相比，FectoVIR-AAV®可重复性地大幅提高 AAV 产量，可高达10 倍（Fig. 1）。


Fig 1. 和竞争者相比，FectoVIR®-AAV 可提高rAAV-2-GFP的滴度（functional title）达10倍。按厂家推荐条件进行转染，72小时后收取病毒。


扫描二维码添加Polyplus官方微信或者公众号搜索Polyplus 转染专家获取更多丰富的转染知识和产品信息！

‍

【声明】内容源于网络
0
0
Polyplus转染专家
Polyplus是一家专注于为科学研究、生物制品以及细胞和基因治疗生产提供上游工艺解决方案的生物技术公司。超过20年创新的核酸转染经验，polyplus上游解决方案专为满足从科学研究到临床开发而定制，遵循严格的科学规范和监管要求。
内容 114
粉丝 0
Polyplus转染专家 Polyplus是一家专注于为科学研究、生物制品以及细胞和基因治疗生产提供上游工艺解决方案的生物技术公司。超过20年创新的核酸转染经验，polyplus上游解决方案专为满足从科学研究到临床开发而定制，遵循严格的科学规范和监管要求。
总阅读37
粉丝0
内容114