作者:河北工程大学附属医院检验科 主管技师 耿丽霞
安图生物 河北应用工程师 王晓丽
作为一名检验工作者,在实际的日常审核工作中最不想看到的结果是0值甚至负值。但这种大概率异常的结果却总会神出鬼没出现在你的眼前,这就需要你具有孙悟空的“火眼金睛”,一眼能将其看透。
案 例
患者,男,46岁,黄疸,胰腺脓肿,就诊于普外科。腹水颜色为深黄色,腹水生化结果如下:
(点击看大图)
图一
我院检验科安装有安图磁悬浮流水线,生化分析仪为TBA-FX8仪器,试剂厂家为北京安图。
淀粉酶第一次结果为-1661 U/L,第二次复查结果为3.4 U/L,显然其结果是有问题的。查看当天伯乐质控,高值和低值均正常,说明检测系统无问题。考虑可能原因为样本本身浓度太高,底物耗尽导致结果异常。
由于α-淀粉酶(α-AMY)测定反应模式为速率法上升曲线,当出现这种情况时,可采取用生理盐水稀释重新测定。
案例
分析
用生理盐水5倍稀释后测定值为2510 U/L(回算浓度值为12550U/L);10倍稀释后测定值为5910 U/L(回算浓度值为59100 U/L);100倍稀释后测定值为663.5 U/L(回算浓度值为66350 U/L),三次稀释后的结果均不一样,那究竟哪一次结果才是正确的呢?
查看说明书试剂性能线性一栏:在(0-1000]U/L范围内,α-AMY试剂盒的线性相关系数r应不低于0.9900;在(0-100]U/L范围内绝对偏差应不超过10U/L;在(100-1000]U/L范围内相对偏差应不超过±10%。
其线性范围为0-1000U/L,而该样本5倍稀释、10倍稀释后的结果也都不在线性范围内,故只有100倍稀释的结果才是可信的。
我们也可以从下面分别用生理盐水稀释10倍(图二)和100倍(图三)后得到的反应曲线上窥见一斑。由于样本浓度过高,出现底物耗尽,造成吸光度异常上升,在其Main Read Timing 6-12读点区域内已经不能正确反映其浓度。
图 二
图 三
图二可见Main Read Timing 6-12读点区域内反应曲线呈现抛物线弧形,而非直线,值5910.7U/L超出其测定的线性范围0-1000U/L。
而图三可见Main Read Timing 6-12读点区域内反应曲线呈现直线形,值663.5U/L正好落在其测定的线性范围0-1000 U/L之内。
从图二和图三也可以看出100倍稀释后结果(即66350 U/L)更为准确。
和安图厂家工程师沟通后,根据科室样本情况,结果分析,针对酶类项目,结合生化分析仪TBA-FX8弹性读点功能,在本科室使用的安图流水线软件设置异常结果自动稀释复测功能,在结果更加精准同时,大大减少了异常样本流转及稀释的时间,方便快捷,为我们检验工作者节省了时间和精力。
| 弹性读点功能概述: 当通过 RATE 法在主要读取时间内的有效吸光度测定点为两个或更少时,根据从弹性读取时间内数据点所获得的吸光度变化计算浓度/活性。在弹性读取时间内获得的吸光度数据并且会有相应标识。 弹性读点功能目的: 为了扩展校准曲线的线性范围并减少再检率,正常样品采用主要读取时间内的数据点,高浓度或高活性样品采用在弹性读取时间内的数据点。 |
案例
总结
检验工作者在日常实际工作中,使用速率法测定酶的活性时,碰到底物耗尽所致异常结果,不能简单稀释,只要出数据就认为解决了。而要通过查看其反应曲线,确定合适的稀释倍数,使其反应曲线在读点区域内呈现线性。这就要求工作人员应该充分利用自己掌握的专业知识,学会分析生化反应曲线,在实际工作中不断积累经验,才能保证检验结果的准确性。


