我们在2569号公告《农药登记资料要求》中会看到对于原药登记的产品环境试验中会涉及鸟类急性经口毒性试验,今天小编梳理了关于这方面的技术要点,供大家参考使用。
(一)试验概述和试验准则:
(1)释义与说明:对某种鸟类高毒或剧毒的(LD50≤50mg a.i./kg体重),还需再以另一种鸟类进行试验。
(2)试验概述(序贯法):
试验由多个阶段组成,每个阶段将被试物按设计剂量经口灌喂至受试鸟嗉囊或腺胃。给药后观察14d,通常根据给药后3d各处理组受试鸟的死亡情况估算LD50并设置下一阶段剂量。以全部阶段的试验结果计算被试物对受试鸟的LD50、置信区间和剂量/效应曲线斜率。
(3)试验概述(经典剂量效应法):
将被试物按设计剂量经口灌喂至受试鸟嗉囊或腺胃,定期观察受试鸟的中毒与死亡情况;计算被试物对受试鸟的LD50、置信区间和剂量/效应曲线斜率。
试验准则为:NY/T 4194.1、NY/T 4194.2、OECD223、US EPA OCSPP 850.2100
(二)技术要点有以下几点:
1、受试鸟品种明确,为不处于繁殖期的成鸟(试验前采用短光照模式);
2、受试鸟应为同一来源、同一繁殖种群,且日龄大致相同,种群自然死亡率≤1%;
3、试验开始前应在试验条件下预养至少14d,预养期间死亡率≤5%;
4、经典剂量效应法试验中,试验开始时所有受试鸟的体重不应超过平均体重的±10%;
5、试验期间对照组受试鸟死亡率不应>10%;
6、采用序贯法时满足相关单笼饲养要求;
7、采用经典计量效应法时应按几何级数至少设置5个处理组和1个对照组,每组受试鸟数量相同(至少10只,通常雌雄各半,分笼饲养),至少应有3个处理组受试鸟死亡率介于0%和100%之间;
8、限度剂量为2000mg被试物/kg体重或按NY/T2882.3计算出的鸟类PEDacute的10倍(取高值);
9、将供试物装入胶囊或溶解/分散在适当的载体中或液体制剂类供试物直接经口灌喂给药。
10、胶囊灌喂法一般适用于毒性较低的原药或不溶于水的颗粒剂;
11、直接灌喂时首选水、其次玉米油作为载体给药,均不可行时才考虑其他载体;
12、水以外的载体对鸟的毒性应为已知低毒,且不会引起吐食(可用食用色素亮蓝将饲料染色观察);
13、经口灌喂法给药量一般不超过1.0mL/100g bw(所用处理组和对照组给药量均应一致);
14、应使用适宜的灌喂工具注入受试鸟嗉囊或腺胃;
15、受试鸟给药前禁食(日本鹌鹑整夜禁食),给药时随机分配至各组。每只受试鸟均应有单独标识;
16、应提供受试鸟饲养条件:鸟笼规格和材料、温度、湿度、光照时间、光照强度、饲料和饮用水等;
17、应提供各个处理组受试鸟出现死亡/中毒症状的数量及其出现(终止)的时间,每只受试鸟的体重数据,饲料消耗量数据,各处理组受试鸟大体解剖的数量及症状(含典型照片);
18、应提供以mg a.i./kg体重和mg被试物/kg体重计的LD50及其置信区间;
19、提供剂量-效应曲线的斜率、回归模型拟合度,包括具体的统计方法、统计软件等。
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