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二硫键修饰肽的高效分析与纯化:选择Phenomenex Luna的理由

二硫键修饰肽的高效分析与纯化:选择Phenomenex Luna的理由 飞诺美
2025-10-24
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在现代生物制药领域,随着抗菌药物耐药性的加剧,药物化学家们致力于开发新型抗菌化疗药物,其中海洋生物提取抗菌肽 (AntiMicrobial Peptides) 构成了一个令人兴奋的研究领域。二硫键修饰肽因其在抗菌、抗癌等生物活性方面的突出作用,成为药物开发中的重要研究方向。如何高效分析和纯化这些肽类,仍然是实验室面临的一大挑战。《MDPI》杂志的一项研究[1]聚焦抗菌肽 Capitellacin,通过化学合成类似物,系统探究其分子内二硫键的功能的同时,验证乙烯基硫醚作为二硫键替代物的可行性,为开发新型窄谱抗菌剂提供了关键依据。在该研究中,研究人员使用Phenomenex的Luna色谱柱来对合成肽进行分析和分离纯化,这也许可以给相似研究工作者带来一些参考和借鉴。



研究团队要合成两类共 9 种 Capitellacin 类似物(二硫键修饰 + 乙烯基硫醚替代),并且完成从粗肽合成纯化到活性分析。



高纯度制备:

Fmoc-SPPS 合成后,粗肽经半制备型 Luna 柱纯化,最终获得纯度 > 95% 的类似物,为后续 MIC(最小抑菌浓度)和 CD(圆二色谱)实验提供 “无杂质干扰” 的样品基础;

异构体分离:

合成乙烯基硫醚类似物时,曾出现热力学 / 动力学异构体混峰,Luna 柱凭借独特选择性,可以观察到不同异构体峰(如 “Dap18” 类似物的两个同质量杂质峰),帮团队锁定了保护基迁移的关键问题;



活性关联:

研究发现 “疏水度(RP-HPLC 保留时间)与大肠杆菌活性正相关”——Luna 柱的稳定保留时间重复性,让这一关联分析有了可靠的数据支撑,直接助力揭示抗菌肽活性规律。



Luna 已经成为世界上广为应用的反相色谱柱,因为它始终将目光交集在色谱分离的


两个重要指标:分离度和峰形。独特键合技术造就的高柱效和高键合相表面覆盖度使其始终能得到尖锐的色谱峰。



多肽分子极性差异小、易出现共洗脱,对色谱柱的选择性和稳定性要求极高。而 Luna C18 柱恰好踩中了这些需求点:

适用性稳定:

实验中用到 “5% B 到 65% B 梯度洗脱”“65℃流动相温度”,Luna 柱全程稳定,无柱效下降问题;

选择性优秀:

无论是 20 残基的天然抗菌肽,还是带乙烯基硫醚 / 二硫键的修饰类似物,都能实现基线分离;

扩展性一致:

从分析型(4.6mm×250mm)用于粗肽分析,到半制备型用于样品纯化,一套柱子覆盖 “分析 - 制备” 全流程,减少方法转移的麻烦。



科研人的 “靠谱工具”,从来都不是 “背景板”

在这篇研究里,Luna 柱不只是 “分离工具”—— 它帮团队确认了 “子弹类似物对大肠杆菌的选择性活性”,验证了 “乙烯基硫醚作为二硫键替代物的可行性”,甚至为 “疏水度预测活性” 提供了量化依据。可以说,每一个关键结论的背后,都有精准色谱数据的支撑。


如果你也在做肽类合成、抗菌肽筛选,或者需要稳定可靠的反相色谱方案,不妨试试 Phenomenex Luna C18 柱 —— 毕竟,好的工具,能让科研效率翻倍!


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参考文献:

1. MDPI, "Study on the Separation of Disulfide Bonded Peptides Using High Performance Liquid Chromatography," 2025.


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phenomenex很自豪能成为丹纳赫的一员




【声明】内容源于网络
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