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崔宇 郑喆
第七代 Vanquish CAD P系列电雾式检测器一经推出，便赢得行业广泛关注与深度探讨。两大核心疑问：能否复现优化部分药典品种？已有 CAD 方法能否无缝转移？逐一为您解答！
大观霉素（链霉菌来源氨基环醇类抗生素）无共轭结构、紫外吸收弱，无法用紫外检测器常规分析。通用型 CAD 检测器以高灵敏度、稳定重现性，成为此类抗生素检测的首选。
1.1 仪器
Thermo Scientific™ Vanquish™ Vanquish Core HPLC色谱系统：
系统Base：Vanquish Core (VC-S01-A-02)
泵：Quaternary Pump CN （VC-P21-A-01）
自动进样器：Split Sampler C （VC-A13-A-02）
柱温箱：Column Compartment C （VC-C10-A-03）
检测器：Vanquish Horizon CAD P（VH-D21-A-01）
软件：Chromeleon™ 7.3 CDS
1.2 色谱条件
色谱柱：Acclaim AmG C18，3.0×150mm，3µm（P/N：088755）
流动相：0.1mol/L三氟乙酸水溶液，等度洗脱
流速：0.4mL/min
柱温：25℃
进样量：5μL
CAD检测器：蒸发温度：35℃，采集频率：5Hz，过滤常数：3.6S
1.3 实验结果
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赛默飞 Acclaim AmG C18 柱（聚合物包膜技术）在强酸、高水相环境中稳定抗水解，适配 0.1mol/L 三氟乙酸水溶液色谱条件。检测显示：大观霉素主峰及有关物质检出完全、分离度良好；定量限 5ng（1.0ppm，S/N=11.7，5μL 进样），6 次重复进样 RSD（保留时间 0.06%、峰面积 0.87%），1-20ppm 线性 R²＞0.999（PV=1.5）。该方法高灵敏、高精密度、良好线性，完全满足盐酸大观霉素检测需求。
1.4 结果与讨论
蒸发光散射检测器响应值与被测物质量呈指数关系，需对数转换；CAD 检测器响应值与质量数多为非线性，需对数转换或二次函数计算，小范围（如大观霉素 1-20ppm）可呈一次线性。部分场景需宽浓度范围考察一次线性，结合 CAD 响应一致性，精准获取样品主成分纯度等信息。
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新型CAD P 系列检测器便捷 PV 值优化功能，扩宽一次线性范围，减小结果偏差。大观霉素案例：1-200ppm 浓度下，4 种 PV 值（1.5/1.8/2.0/2.2）测定显示，仅 PV=2.0 可一次线性拟合（R²＞0.999），其余为二次函数；1-600ppm 时，PV=2.2 一次线性最优。实际应用可按浓度范围选最优 PV 值，高效完成含量测定。新型CAD P 系列检测可同时设 4 个 PV 值，缩短筛选时间，提升方法开发效率。
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CAD P 系列检测器 3 选 1 切换阀，按需设置更灵活。如图：1.6-2.6min 阀切，将无关基质切至废液，保留盐酸大观霉素及杂质，降低污染、提升仪器耐用性、减少维护成本。检测器空置 / 报错时，阀切至废液 / 旁路，避免检测器被淹，保障仪器安全性。
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从标准地位到市场应用，去氧胆酸与 CAD 检测器形成稳定适配：其一，作为 CAD 的常检品种，去氧胆酸已被 USP 收录并沿用多年，是其含量与杂质检测的金标准；其二，凭借标准权威性与检测适配性，目前已有较多客户采用 CAD 检测器开展去氧胆酸检测工作。
2.1 仪器
Thermo Scientific™ Vanquish™ Flex UHPLC色谱系统：
系统Base：Vanquish Horizon/Flex (VF-S01-A-02)
泵：Vanquish Quaternary Pump F (VF-P20-A)
自动进样器：Vanquish Split Sampler FT (VF-A10-A-02)
柱温箱：Vanquish Column Compartment H (VH-C10-A-03)
检测器：Vanquish Charged Aerosol Detector HP (VH-D21-A-01)
Vanquish Charged Aerosol Detector H (VH-D20-A)
软件：Chromeleon™ 7.3.2 CDS
2.2 色谱条件
色谱柱：Acclaim™ 120 C18 3µm,4.6 × 150 mm (P/N 059133)
流动相：A：0.1%甲酸水溶液，B：0.1%甲酸乙腈 ，梯度洗脱见表1
表1 梯度洗脱程序
流速：1.0mL/min
柱温：30℃，空气循环模式（风扇速度5），主动预热
进样量：25μL ，进样器温度：8℃
Vanquish CAD H的PFV值：1.0,1.2,1.4,1.6
Vanquish CAD HP的PV值：
CAD通用参数：蒸发温度：50℃，采集频率：20Hz，过滤常数：2、3.6、5、10s
2.3 实验结果
CAD 检测器核心参数：PV 值（原 PFV 值）、蒸发温度、过滤常数。从 Vanquish CAD H 转移至 Vanquish CAD HP，需考察这些参数的调整。结果：蒸发温度 50℃，两款均满足 S/N；过滤常数 5s，两款均兼顾噪音与峰宽。需注意：两者 PFV 值与 PV 值数值差异较大，需验证。
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为对比去氧胆酸的线性表现，设定 Vanquish CAD H 的 PFV 值为 1.0、1.2、1.4、1.6，Vanquish CAD HP 的 PV 值同时设为 1.5、1.8、2.1、2.4，考察浓度范围 0.5-10 μg/mL 的线性关系。实验结果表明：Vanquish CAD H （PFV=1.2），Vanquish CAD HP （PV=1.8），可得到最佳一次线性结果，R²=1.00；且两者残差均随机分布在零线（y=0）附近，验证了所选线性模型的拟合有效性。
图11 去氧胆酸CAD色谱图及系统适应性结果（n=10）（点击查看大图）
系统适用性结果：去氧胆酸 0.01mg/mL 时，两款 CAD 检测器峰面积 RSD 均＜3.0%；0.0005mg/mL 时，S/N 均＞10，灵敏度达标。两款均满足 USP 法测定去氧胆酸要求。
2.4 结果与讨论
图12 Legacy mode下无缝转移（点击查看大图）
从模式功能到方法转移，Vanquish CAD P 系列形成完整解决方案：① 模式选择：Easy（单通道 PV）、Advanced（4 通道高效筛选）、Legacy（旧 PFV 自动转换）；② 转换逻辑：PFV×1.5 = 新 PV，去氧胆酸案例（1.2→1.8）与实验数据吻合；③ 核心价值：旧参数安全转换，方法转移便捷高效，降低操作成本。
小 结
Vanquish CAD P 电雾式检测器针对 2025 版《中国药典》盐酸大观霉素检测场景，精准攻克蒸发光散射检测器（ELSD）灵敏度低、重复性差的核心痛点，一键获得更宽线性，结果偏差最小，显著提升药典方法适用性，切换阀保耐用。去氧胆酸 USP 方法轻松转移，客户无忧！
参考文献：
[1] 中国药典2020版第二部 盐酸大观霉素
[2] AN_25052_HPLC 高效液相色谱法- 电雾式检测器检测大观霉素的方法研究
[3] The United States Pharmacopoeia[M]. The United States Phar macopeial Convention, 2016.
[4] TN_3816 Method transfer and optimization of deoxycholic acid analysis using HPLC-CAD
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