01 研究背景
男性不育约占人类不育症的50%。在40%至50%的不育男性中，病因不明[1-7]。男性不育的病理生理学可以通过分子和生化水平上表现的多种细胞异常来解释，这些异常导致精液中精子的质量和数量下降[3-5]，以及生殖激素失衡。此外，普遍观察到少精症是导致男性生育能力下降的最常见原因。
阿育吠陀是印度传统医学体系，其历史可追溯至公元前6000年[8-11]。在这一漫长的历史进程中，南非醉茄（因其具有恢复活力的功效而被称为“印度人参”）在民间医学中被描述为一种增强性功能和延缓衰老的补品[12]。它被归类为“适应原”，这意味着这种草药有助于抵抗压力和疾病，提高体力和新陈代谢，且不会产生不良反应[13-16]。南非醉茄在阿育吠陀医学中被用作“拉萨亚纳”。特别是南非醉茄的根被视为一种补品和增强性功能的药物。在梵语中，Ashwagandha的意思是“马的气味”（ashwa—马，gandha—气味），可能源于其根部的气味。其种名somnifera在拉丁语中意为“使人入睡的”[17]。
南非醉茄富含多种化学化合物，包括生物碱、倍半萜甾类、氨基酸和神经递质等，这解释了其具有众多的药用特性，这些特性能够直接或间接地预防和治疗多种疾病[18-20]。
已有大量文献表明，除了常规疗法之外，许多存在性功能障碍的患者往往会寻求其他疗法。值得注意的是，自古以来，南非醉茄就被阿育吠陀医家用作增强性欲的药物，以改善与不孕症及性行为相关的问题。众多的人类和动物研究已经证实了南非醉茄的性兴奋和睾酮提升功效[8-11, 21-23]。
不同的研究者均指出，南非醉茄对男性不育症的治疗具有积极作用[5, 21-23]。实验研究表明，使用南非醉茄治疗可直接作用于生精小管，促使未成熟的威斯特兰大鼠的睾丸发育和精子生成[5, 24, 25]，改善性迟缓小鼠的性兴奋行为，并提高睾丸每日精子产量和血清睾酮水平[5]。
已有大量研究证实，精液中高浓度的活性氧物质（ROS）会损害精子，并与精子参数异常有关，从而导致不育[21, 26-30]。而南非醉茄已被发现能够抑制不育男性体内ROS的生成[21, 22, 27]。 尽管有众多研究报道了南非醉茄在治疗各种疾病方面的有效性，但专门进行的双盲、随机、安慰剂对照研究来评估南非醉茄治疗男性不育症的效果却很少，而且大多缺乏关于该疗法安全性和耐受性的关键数据。
因此，本研究旨在探究一种高浓度、全谱的南非醉茄根提取物作为一种合适的草本补充剂在治疗男性不育症方面的有效性。
02 受试人员
本次研究对68名不育男性进行了评估，以确定其是否符合本研究的纳入条件。在获得书面知情同意后，纳入了46名年龄在22至40岁之间、因精液因素导致不育的男性患者。所有男性患者的精子计数为500万至2000万/毫升，总活动率为10%至30%，前向运动率低于15%，异常形态精子低于70%。所有男性患者在过去一年中与妇科检查正常的女性伴侣有规律的性生活，且女方无明显不孕症状。
总精子数低于0.5百万/毫升或高于2000万/毫升的男性未被纳入研究。此外，患有原发性勃起功能障碍、先天性异常、未控制的糖尿病、严重肝肾功能不全、心血管疾病、脑血管意外、未控制的高血压，或有隐睾症、精索静脉曲张和睾丸肥大病史的男性也被排除在外。有骨盆骨折史、前列腺切除术史、阴茎重建或假体手术史，或有完全或部分梗阻性少精子症的男性也被排除。入组患者在入组前四周内及整个研究期间均未使用任何 PDE-V抑制剂（西地那非、他达拉非或伐地那非）和糖皮质激素。已知对南非醉茄提取物过敏的患者也被排除在外。
03 试验设计
这是一项在印度五家不孕症中心开展的双臂、双盲、随机、安慰剂对照、平行组研究，采用1:1随机分配。该研究依照印度医学研究理事会（ICMR-GCP）的良好临床实践指南和《赫尔辛基宣言》进行，并获得了“联盟健康独立伦理委员会”的批准。
研究对象被随机分为以下两组：（i）安慰剂组（共25人）；（ii）南非醉茄治疗组（共21人）。南非醉茄治疗组的研究对象每日口服一次（每次1粒，每粒含225毫克高浓度全谱南非醉茄根提取物），持续12周；而安慰剂组则服用同样剂量（225毫克）的安慰剂胶囊，持续时间相同。 本研究中所使用的南非醉茄根提取物——KSM-66南非醉茄（来自印度海得拉巴Ixoreal Biomed Private Ltd），是通过一种独特的加工技术提取而成的，能产生一种具有全谱特性的植物提取物，能极大地增强南非醉茄的作用，使其具有广泛的治疗效果。值得注意的是，尽管市面上有各种南非醉茄粉末和提取物可供选择，但南非醉茄提取物的标准化和优化存在严重缺陷。KSM-66南非醉茄的测定方法是通过高效液相色谱法（HPLC）来测量其与黄酮类化合物的含量，其含量至少达到5%。它含有所需的一定量的黄酮类化合物和生物碱、短链和长链氨基酸（苏氨酸、缬氨酸、甲硫氨酸、异亮氨酸、赖氨酸、天冬氨酸和精氨酸）、复合糖类（包括寡糖/果聚糖）、维生素 A、钙和铁。
04 试验结果
对68名不育男性进行了评估，以确定其是否符合本研究的纳入条件。最终有46名男性被选入研究。本研究展示了这46名少精症男性在一项双盲试验中的数据，他们被随机分配到安慰剂组（n=25）或高浓度全谱南非醉茄根提取物治疗组（n=21）。
两组在人口统计学参数（表1）以及包括精液参数和血清性激素水平在内的所有基线数据方面均相似（表2）。
表1 研究人员的基线数据
表2南非醉茄治疗组和安慰剂组少精症男性的精液分析结果
a. 精液参数
使用南非醉茄根提取物进行90 天的治疗结束后，精子浓度显著增加（P<0.0001），与研究期间第0天的基线值相比（表2）。精子浓度从9.59±4.37×10^6/mL增加到25.61±8.6×10^6/mL，增幅为167%。在第90天，精液量（从1.74±0.58 mL增加到 2.76±0.60mL；P<0.0001）和精子活力（从18.62±6.11% 增加到29.19± 6.31%；P<0.0001）也出现了统计学意义上的显著增加，分别增加了53%和57%。
b. 血清激素水平
此外，与安慰剂治疗相比，使用南非醉茄根提取物治疗后，血清激素水平有了显著的改善和调节。南非醉茄根提取物治疗使血清睾酮水平显著增加了17%（从4.45±1.41纳克/毫升增加到5.22±1.39纳克/毫升；P<0.01），促使黄体生成素水平增加了34%（从3.97 ± 1.21微国际单位/毫升增加到5.31± 1.33微国际单位/毫升；P<0.02），与这些参数的基线（第0天）值相比（表2、图1和图2），治疗后这些数值均有显著变化。
在全谱南非醉茄根提取物治疗组和安慰剂治疗组中，包括少精症男性在内的受试者的血清睾酮水平（单位：纳克/毫升）：与研究持续期（12 周）第0天的基线值相比，差异显著（P<0.0001）。数据以平均值±标准差的形式呈现。
在全谱南非醉茄根提取物治疗组和安慰剂治疗组中，包括少精症男性在内的受试者血清促黄体生成素水平（单位：毫升国际单位/毫升）。与研究开始日（12 周）的基线值相比，*P<0.001。数据以平均值±标准差的形式呈现。
(a) 患者总体耐受性评估量表（GATE） (b) 医师总体耐受性评估量表（GATE）
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