国家药监局发布化妆品微生物检验等7项新方法
2026年11月2日，国家药品监督管理局发布公告，将《化妆品中微生物检验方法总则》等7项检验方法纳入《化妆品安全技术规范》。同日，中国食品药品检定研究院发布相关方法问答，对技术细节进行解读。
标准概况与实施时间
此次发布的7项方法中，《化妆品中洋葱伯克霍尔德菌群的检验方法》和《胶原蛋白凝胶眼刺激性试验方法》为新增方法；其余5项为修订方法，替换原有标准。
实施时间节点：
- 2027年5月1日起实施：《胶原蛋白凝胶眼刺激性试验方法》。
- 2027年12月1日起实施：《化妆品中微生物检验方法总则》及菌落总数、耐热大肠菌群、金黄色葡萄球菌、霉菌和酵母菌总数、洋葱伯克霍尔德菌群等6项微生物检验方法。
在正式实施前，鼓励化妆品注册人、备案人及相关检验机构提前采用上述新方法。
重点方法修订解读
一、化妆品中微生物检验方法总则
修订背景与主要内容
鉴于化妆品防腐体系日益复杂，原方法缺乏培养基质量评价及方法适用性试验要求，易导致假阴性结果。此次修订参考ISO、USP等国际标准，主要变化包括：
- 新增实验室基本要求：明确环境、人员、设备、菌株管理等规范。
- 新增培养基质量评价：规定每批次需进行促生长、抑制能力及生化特性评价，建立参比培养基制度。
- 新增方法适用性试验：明确稀释、中和剂、薄膜过滤等消除抑菌成分的方法，避免防腐剂干扰。
- 强化生物安全与质控：规范对照试验设置、人员考核及检验后样品无害化处理。
行业影响
新标准补齐了技术管控短板，显著提升检验结果的准确性和可靠性，有助于规范企业及检测机构的质量管理体系，强化微生物污染风险防控。
二、化妆品中菌落总数的检验方法
主要修订内容
- 增加质控菌株使用要求，明确3株推荐菌株。
- 操作步骤中增加薄膜过滤法，通过调整冲洗液或使用含中和剂稀释液消除抑菌性。
- 规范薄膜过滤法的计数方法和结果报告规则。
- 优化显色剂氯化三苯四氮唑的使用浓度，提高计数准确性。
行业影响
新方法能更真实反映产品微生物污染水平，尤其适用于儿童、眼唇等高风险产品的严格限量管控，为企业生产卫生控制提供更强有力的数据支撑。
三、化妆品中耐热大肠菌群的检验方法
主要修订内容
- 优化发酵流程：由“一步发酵”调整为“两步发酵”（先36℃初发酵，后44.5℃复发酵），降低基质效应，提高灵敏度。
- 简化判定步骤：取消靛基质试验，直接依据44.5℃培养产酸产气情况进行判定。
- 增加方法适用性描述及推荐质控菌株信息。
行业影响
新流程提高了检测灵敏度和一致性，减少了假阴性风险，同时优化后的判定方法有助于降低企业检验成本。
四、化妆品中金黄色葡萄球菌的检验方法
主要修订内容
- 延长增菌时间：SCDLP液体培养基或7.5%氯化钠肉汤培养时间由24h调整为24～48h，提高检出率。
- 增加鉴定手段：允许使用生化鉴定试剂盒或微生物鉴定系统进行辅助鉴定。
- 增加必要时进行方法适用性试验的要求。
行业影响
提升了方法灵敏度和多样性，消除了假阴性风险，进一步完善了微生物检验标准体系。
五、化妆品中霉菌和酵母菌总数的检验方法
主要修订内容
- 改良培养基：将“孟加拉红培养基”改为“卵磷脂-吐温80-孟加拉红培养基”，增加中和成分以消除防腐剂干扰。
- 调整培养温度：由28±2℃调整为25±1℃，延缓菌落蔓延，便于观察计数。
- 新增薄膜过滤法：作为消除抑菌性的备选方案。
- 修改计数范围：适宜计数范围由5～50 CFU调整为15～150 CFU，减少随机误差。
行业影响
通过优化配方和条件，有效降低因防腐体系和菌落蔓延导致的检测误差，提升真菌污染风险识别能力。
六、化妆品中洋葱伯克霍尔德菌群的检验方法（新增）
制定背景与内容
洋葱伯克霍尔德菌群是化妆品中高发的条件致病菌，现行规范缺乏专属检验方法。新标准填补了这一空白，主要规定：
- 使用SCDLP液体培养基进行增菌。
- 采用BCSA选择性琼脂培养基分离，36±1℃培养48～72h。
- 规范生化鉴定流程，并允许使用分子生物学技术进行补充鉴定。
行业影响
统一了检验操作规范，解决了以往方法不统一、结果不可比对的问题，显著提升了对该高危致病菌的风险防控能力。
七、胶原蛋白凝胶眼刺激性试验方法（新增）
制定背景与要点
为贯彻3R理念（替代、减少、优化动物试验），本标准参考OECD TG 494指南转化而来，作为眼刺激性评价的替代方法之一。
特别关注点：
- 适用于单一成分化妆品原料的眼刺激性评价。
- 需构建符合跨膜电阻要求的角膜上皮模型。
- 对电阻仪的量程、灵敏度及电极稳定性有严格要求。
附件列表：
1.《化妆品安全技术规范》7项标准制修订项目汇总表
2.化妆品中微生物检验方法总则
3.化妆品中菌落总数的检验方法
4.化妆品中耐热大肠菌群的检验方法
5.化妆品中金黄色葡萄球菌的检验方法
6.化妆品中霉菌和酵母菌总数的检验方法
7.化妆品中洋葱伯克霍尔德菌群的检验方法
8.胶原蛋白凝胶眼刺激性试验方法