细菌性阴道病(Bacterial Vaginosis, BV)是育龄女性最常见的阴道感染之一。传统检测依赖Amsel临床标准和Nugent革兰染色评分,操作复杂、判读主观。如今,一张小小的试纸条就能在几分钟内完成多项指标的联合检测(市售产品从六联检到十一联检不等)--涵盖了的过氧化氢、白细胞酯酶、凝固酶、脯氨酸氨基肽酶、唾液酸苷酶、乙酰氨基葡萄糖苷酶、葡萄糖苷酶、pH值、β-葡萄糖醛酸苷酶和精氨酸氨基肽酶,全面评估阴道微生态状况。它的灵敏度、准确性和稳定性,与所采用的核心原料密不可分。西宝生物(Seebio®)深耕体外诊断原料领域多年,为BV联检试剂盒的生产厂家提供酶底物到显色体系的一站式原料解决方案,咨询热线400-021-8158.
BV联检各模块的检测原理
1. 过氧化氢(H₂O₂)/ 高浓度过氧化氢
正常阴道乳酸杆菌代谢产生H₂O₂,维持酸性环境。检测采用辣根过氧化物酶(HRP)催化H₂O₂氧化色原底物(如TOPS、HDAOS等),发生Trinder反应显色,颜色深浅反映H₂O₂浓度。高浓度过氧化氢检测原理相同,但检测灵敏度阈值设置更高,用于区分正常生理水平与需氧菌性阴道炎(AV)相关的高浓度H₂O₂,同样以HRP-色原体系检测。
2. 白细胞酯酶(LE)
阴道炎症时多核白细胞释放该酶。底物(如5-溴-4-氯-3-吲哚乙酸盐)被酶水解后释放吲哚酚,在氧存在下氧化显色,呈色程度与炎症强度相关。
3. 凝固酶
凝固酶(Coagulase)由葡萄球菌等致病菌产生,并非用于诊断BV本身,而是作为一项关键指标,用于辅助诊断需氧菌性阴道炎(AV)或识别混合感染。当样本中存在凝固酶时,它会特异性地切割底物甘氨酰-精氨酸-4-甲氧基-2-萘胺,释放出游离的4-甲氧基-β-萘胺。随后,加入的显色剂(如肉桂醛)与该游离产物发生反应,生成紫红色的偶氮化合物,从而指示阳性结果,颜色深浅与酶活性成正比。也可使用N-α-苯甲酰-DL-精氨酰-4-硝基苯胺作为底物,其被酶切后可直接显黄色。
4. 脯氨酸氨基肽酶(PAP)
BV患者厌氧菌大量繁殖,产生高活性PAP。该酶水解L-脯氨酸-对硝基苯胺,释放黄色对硝基苯胺,显色强度与酶活性成正比。
5. 唾液酸苷酶(Sialidase)
BV最特异的标志物,主要由加德纳菌、拟杆菌产生。该酶水解5-溴-4-氯-3-吲哚-乙酰神经氨酸(X-Neu5Ac),释放吲哚酚,再与固紫盐偶联生成紫色沉淀,阳性即提示BV。
6. 乙酰氨基葡萄糖苷酶(NAG)
阴道菌群失调时该溶酶体酶活性升高。可用下述两种方法检测:
· PNP-NAG法:底物对硝基苯-N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷(PNP-NAG)被水解后释放对硝基苯酚,在碱性条件下呈黄色。
· X-GlcNAc法:底物5-溴-4-氯-3-吲哚基-N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷被酶解释放出5-溴-4-氯-3-吲哚酚(indoxyl)中间体。该中间体在有氧条件下自发发生氧化与二聚化反应,形成不溶性的蓝绿色沉淀,从而直观指示NAG的酶活性。
7. 葡萄糖苷酶
参与糖代谢,菌群紊乱时活性改变。底物5-溴-4-氯-3-吲哚-β-D-吡喃葡萄糖苷(X-Glc)被酶水解显色,反映微生态变化。
8. pH值
正常阴道pH为3.8~4.5,BV时升高至>4.5。采用溴甲酚绿、甲基红等酸碱指示剂固定于反应垫,接触分泌物后变色,与比色卡比对判读。
9. β-葡萄糖醛酸苷酶
大肠杆菌等需氧菌的特征酶。底物5-溴-4-氯-3-吲哚基-β-D-葡萄糖醛酸苷钠盐(X-Gluc)被酶解后释放吲哚酚,氧化产生蓝色沉淀,提示需氧菌感染。
10. 精氨酸氨基肽酶
氨基肽酶家族成员,菌群失调时活性升高。底物精氨酸-对硝基苯胺(Arg-pNA)被水解后释放黄色pNA,辅助判断微生态改变。
产品列表
中文名称 |
英文名称 |
CAS |
货号 |
过氧化氢/高浓度过氧化氢 |
|||
辣根过氧化物酶 |
Horseradish Peroxidase (HRP) |
9003-99-0 |
ECE0129A |
N-乙基-N-(3-磺丙基)-3-甲基苯胺钠盐 |
N-Ethyl-N-(3-sulfopropyl)-3-methylaniline sodium salt (TOPS) |
40567-80-4 |
DCD0035A |
N-(2-羟基-3-磺丙基)-3,5-二甲氧基苯胺钠盐 |
N-(2-Hydroxy-3-sulfopropyl)-3,5-dimethoxyaniline sodium salt (HDAOS) |
82692-88-4 |
DCD0049B |
白细胞酯酶 |
|||
5-溴-4-氯-3-吲哚乙酸盐 |
5-Bromo-4-chloro-3-indolyl acetate |
3252-36-6 |
DJL0863A |
吡咯酯(3-(N-对甲苯磺酰基-L-丙氨酰氧基)-5-苯基吡咯) |
3-(N-Tosyl-L-alaninyloxy)-5-phenylpyrrole (Tos-Ala-OPPy) |
99740-00-8 |
DJL0792B |
凝固酶 |
|||
甘氨酰-精胺酸-4-甲氧基-2-萘胺盐酸盐 |
Gly-arg 4-methoxy-beta-naphthylamide dihydrochloride |
100940-56-5 |
ACE1237A |
N-α-苯甲酰-DL-精氨酰-4-硝基苯胺盐酸盐 |
Nα-Benzoyl-DL-arginine 4-nitroanilide hydrochloride |
911-77-3 |
ECE1045D |
脯氨酸氨基肽酶 |
|||
L-脯氨酸对硝基苯胺三氟乙酸盐(H-Pro-pNA·TFA) |
L-Proline p-nitroanilide trifluoroacetate (H-Pro-pNA·TFA) |
108321-19-3 |
ECE1115A |
甘氨酰-脯氨酰-对硝基苯胺对甲苯磺酸盐 |
Gly-Pro p-nitroanilide p-toluenesulfonate |
65096-46-0 |
ACE0004A |
唾液酸苷酶 |
|||
5-溴-4-氯-3-吲哚-α-D-乙酰神经氨酸钠盐(BCIN / X-Neu5Ac) |
5-Bromo-4-chloro-3-indolyl α-D-N-acetylneuraminic acid sodium salt (X-Neu5Ac) |
160369-85-7 |
DCE0473C |
固紫B盐 |
Fast Violet B Salt |
14726-28-4 |
EXJ4506B |
乙酰氨基葡萄糖苷酶 |
|||
对硝基苯-N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷(PNP-NAG) |
4-Nitrophenyl N-acetyl-β-D-glucosaminide (PNP-NAG) |
3459-18-5 |
ACE0068A |
5-溴-4-氯-3-吲哚基-N-乙酰-beta-D-氨基葡萄糖苷 |
5-Bromo-4-chloro-3-indolyl 2-acetamido-2-deoxy-D-glucopyranoside |
4264-82-8 |
ECE1039A |
葡萄糖苷酶 |
|||
5-溴-4-氯-3-吲哚-β-D-吡喃葡萄糖苷(X-Glc) |
5-Bromo-4-chloro-3-indolyl β-D-glucopyranoside (X-Glc) |
15548-60-4 |
ECE1141B |
β-葡萄糖醛酸苷酶 |
|||
5-溴-4-氯-3-吲哚基-β-D-葡萄糖醛酸苷钠盐(X-Gluc) |
5-Bromo-4-chloro-3-indolyl β-D-glucuronide sodium salt (X-Gluc) |
129541-41-9 |
ECE1114A |
精氨酸氨基肽酶 |
|||
L-精氨酸对硝基苯胺(二盐酸盐) |
L-Arginine p-nitroanilide (Arg-pNA 2HCl) |
40127-11-5 |
DCE1276A |
pH值 |
|||
溴甲酚绿 |
Bromocresol Green |
76-60-8 |
ACD0008C |
甲基红 |
Methyl Red |
493-52-7 |
AJL0870A |
溴酚蓝 |
Bromophenol Blue |
115-39-9 |
ACD0033A |
西宝生物科技(上海)股份有限公司深耕体外诊断原料领域多年,产品覆盖临床生化、免疫(ELISA/CLIA)、血球尿液、胶体金快诊、核酸诊断等全赛道。针对阴道炎多联检试纸条,我们可提供从高纯度酶底物、显色色原、pH指示剂到专用表面活性剂、缓冲液及膜材耗材的完整供应链,确保高灵敏度、低背景和优异的批间稳定性。
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