恭喜由【齐雪峰课题组团队】主导完成的科学创新性研究论文，已成功在全球领先的学术出版平台Frontiers发表。
《A trans-activating transduction peptide fused nanobody targeting viral nonstructural protein NS4B inhibits bovine viral diarrhea virus replication》
【一种靶向病毒非结构蛋白 NS4B的转导肽融合纳米抗体可抑制牛病毒性腹泻病毒的复制】
Bovine viral diarrhea virus (BVDV) is a major pathogen in cattle globally. Nanobodies (Nbs) possess attractive therapeutic properties, but their efficacy against intracellular targets like BVDV is hindered by poor membrane permeability.
牛病毒性腹泻病毒（BVDV）是全球牛群中的主要病原体。纳米抗体（Nbs）具有良好的治疗特性，但其对 BVDV 等细胞内靶标的作用效果受到膜通透性差的限制。
方法：一种靶向 BVDV 非结构蛋白NS4B的纳米抗体（Nb91）被成功分离。为评估其抗病毒效果，NB91 在细胞内进行了表达。此外，将NB91与细胞穿透肽TAT融合，构建了 TAT-Nb91。在MDBK细胞以及牛内皮细胞 (Bend细胞) 中评估了 TAT-Nb91 的内化效率及其对致细胞病变型（CP）和非致细胞病变型（NCP）BVDV 生物型的抑制作用，其中Bend细胞是 BVDV 在体内的主要靶细胞。同时，还对NB91 在 NS4B 上的表位进行了定位。
Results: Intracellularly expressed Nb91 potently suppressed BVDV replication in MDBK cells (~100% inhibition). TAT-Nb91 was effectively internalized in a dose- and time-dependent manner. It inhibited CP and NCP BVDV replication in MDBK cells by approximately 70% and 40%, respectively, and achieved over 50% inhibition for both biotypes in Bend cells. Epitope mapping identified NS4B amino acids 328-347 as the critical binding region for Nb91.
结果：细胞内表达的 Nb91 能有效抑制 MDBK 细胞中 BVDV 的复制（抑制率约100%）。TAT-Nb91可剂量和时间依赖性地被细胞内化。它分别抑制MDBK 细胞中 CP 型和 NCP 型 BVDV 的复制约70%和40%，在 Bend 细胞中对两种生物型的抑制率均超过50%。表位定位分析表明，NS4B 蛋白的 328-347 位氨基酸是 Nb91 的关键结合区域。
Discussion: These findings demonstrate that a cell-penetrating nanobody targeting the conserved viral protein NS4B can effectively inhibit BVDV replication across relevant cell types and biotypes. This establishes TAT-fused nanobodies as a promising new therapeutic strategy against BVDV.
讨论：这些研究结果表明，一种靶向保守病毒蛋白 NS4B 的穿膜纳米抗体，能够在相关的细胞类型和生物型中有效抑制牛病毒性腹泻病毒（BVDV）的复制。这确立了 TAT 融合纳米抗体作为一种极具潜力的BVDV新型治疗策略。
此次研究聚焦于【Frontiersin Immunology Vaccines and Molecular Therapeutics】领域的前沿挑战，并通过严谨的实验/论证，成功验证了【一种靶向病毒非结构蛋白 NS4B 的转导肽融合纳米抗体可抑制牛病毒性腹泻病毒的复制】。
为【Frontiers in Immunology Vaccines and Molecular Therapeutics】领域的发展提供了新的理论依据和解决方案。
