微生物群落存在显著的菌株异质性,这也使得微生物组研究长期面临一个核心矛盾:我们想知道群落中"谁在那里、在干什么、谁跟谁有关系",但宏基因组Binning只能给出物种水平的平均信号,无法区分菌株级别差异,更无法把功能基因、质粒、噬菌体精确匹配到宿主微生物。
现在,这个问题有了新答案!新一代高通量微生物单细胞基因组测序技术—CAP-seq(Compartment with Adjusted Permeability sequencing),依托半透水凝胶胶囊留存长片段 DNA、通透反应试剂,结合两步微流控高通量捕获单细胞,搭配Barcode 标记实现单菌精准溯源~
1、CAP-seq技术原理
CAP-seq原理基于选择性渗透屏障:封装材料形成的孔径允许小分子物质(如细胞裂解试剂、酶、反应缓冲液)自由扩散,而大分子物质(如扩增后的基因组DNA长片段)则被限制在胶囊内部无法逃逸。这使得成千上万个单细胞能够在同一试管内并行完成裂解、全基因组扩增及条形码标记,最终进行混合建库与高通量测序。
图 半透胶囊/水凝胶封装技术详解图
2、CAP-seq技术四大核心优势
3、CAP-seq VS 传统宏基因组binning 核心维度对比
4、四大主流应用场景
临床微生物 & 耐药研究
病毒 - 宿主互作
大规模鉴定噬菌体、古菌病毒天然宿主,区分溶原/裂解噬菌体调控机制
环境微生物生态
未培养微生物进化

