在神经科学研究中,荧光报告系统是解析神经连接、追踪细胞命运的核心工具。传统的 rosa26-GFP/tdTomato 工具鼠虽应用广泛,却在先进成像技术的要求下逐渐显露短板。而基于mBaojin(保金,Nat Methods. 2024) 和mYonghong(永红,即mScarlet3-H,Nat Methods. 2025) 两款新型荧光蛋白开发的Ci系列工具鼠(Ci,Chinese Institute for Brain Research即北京脑科学与类脑研究所, CIBR),凭借卓越的性能打破了这一局限,既保持了对传统工具的性能优势,更能胜任传统系统无法完成的高难度研究工作,成为神经连接组学研究的全新选择(北脑赵瑚实验室开发,文章尚未发表)。
全新荧光蛋白双星:
mBaojin 与 mYonghong 的硬核特性
mBaojin(绿色)和 mYonghong(红色)是两款经过定向工程改造的单体荧光蛋白,分别基于国际顶级的 StayGold 和 mScarlet3优化而来,针对生物成像的痛点实现了全方位性能升级,堪称荧光蛋白中的 “黄金搭档”。
✦ 超稳红荧光:mYonghong(永红)
作为新一代红色荧光蛋白,mYonghong 的核心优势在于极致的稳定性和高信号质量,完美适配各类严苛的实验条件:
· 热稳定性拉满:90℃高温处理 1 小时仍能保留 90% 的荧光信号,彻底摆脱实验温度波动的干扰;
· 化学稳定性卓越:对四氧化锇(OsO₄,电镜成像关键试剂)耐受性提升 500%,在 CLEM(光镜 - 电镜关联成像)中信噪比直接提升 20 倍;
· 抗漂白 + 快透明:光稳定性达到 STED 超分辨成像标准,且适配 iDISCO 组织透明化技术,24 小时即可完成全脑透明化,实现快速三维成像;
· 单体特性:纯单体结构无聚集,避免对靶蛋白功能的干扰,适配细胞器标记、蛋白融合等精细研究。
✦ 超亮绿荧光:mBaojin(保金)
mBaojin 继承了 StayGold 荧光蛋白的高亮度特性,同时优化为纯单体结构,成为活体成像和超分辨研究的理想选择:
· 高亮且抗漂白:亮度与经典绿色荧光蛋白相当,光稳定性远超 mNeonGreen,适合长时间活体追踪,光毒性更低;
· 纯单体高适配:OSER 实验评分 93.7%,为真正的单体蛋白,可无缝融合至靶蛋白进行亚细胞结构标记,无二聚化干扰;
· 耐酸易成熟:37℃生理温度下快速成熟,酸敏感性极低,在细胞内酸性环境中仍能稳定发光;
· 化学兼容性强:可耐受碱性和酶解处理,完美适配组织膨胀成像(Expansion Microscopy),实现高分辨率结构保真性成像。
两款蛋白均为单体设计,且覆盖红绿荧光通道,可实现双色标记,满足多靶点同时追踪的研究需求。
性能对标传统工具:Ci 系列工具鼠不遑多让,更胜一筹
传统 rosa26-GFP/tdTomato 工具鼠基于 EGFP 、tdTomato 开发,是科研中的 “经典款”,而 Ci 系列工具鼠以 mBaojin/mYonghong 为核心,在基础标记性能上完全对标传统工具,且在信号质量、特异性、稳定性上实现全面超越,让研究人员无需担心 “换工具影响基础结果”。
报告鼠设计特点及应用(部分展示)

✅ 标记效率相当,信号强度更优
在外周神经(Nav1.8-Cre 驱动)和脑内兴奋性神经元(Vglu2-Cre 驱动)的标记实验中,Ci 系列工具鼠的细胞标记效率与 rosa26-GFP/tdTomato 完全一致,可精准靶向目标神经元群体;同时,mBaojin/mYonghong 的荧光信号强度显著高于 EGFP/tdTomato,神经元胞体信号更清晰。在高自发荧光的外周组织对神经投射的成像清晰得多。
对比图 1:外周神经标记成像(Nav1.8-Cre 驱动)
✅ 遗传特异性相当,泄漏表达几乎为零
传统工具鼠包括Ai14, Ai14 由于Rosa26位点的内源启动子活性,偶有背景泄漏表达的问题,尤其神经元组织。而 Ci 系列工具鼠基于无启动子活性的H11 位点设计,经过严格的泄漏测试,在无 Cre 驱动的情况下在神经元无任何泄露表达,遗传特异性完全达标
对比图2:Ci系列工具鼠在神经元没有任何泄露表达
✅ 适配常规成像,操作无需改流程
Ci 系列工具鼠可直接用于常规共聚焦显微镜成像,与传统工具鼠的实验操作流程完全兼容,研究人员无需重新摸索实验条件,实现 “无缝切换”。
核心结论:Ci 系列工具鼠在传统研究场景中,完全能替代 rosa26-GFP/tdTomato,且能获得质量更优的成像数据。
对比图 3:Vglu2-Cre小鼠脑部成像
随着组织透明化、超分辨成像、CLEM 等先进成像技术的普及,传统Rosa26-GFP/tdTomato工具鼠的短板日益凸显:EGFP/tdTomato 热稳定性、化学稳定性差,无法耐受透明化的化学处理和超分辨的长时间光照;细胞质表达导致轴突信号微弱,无法追踪长距离神经投射;无细胞器靶向设计,无法实现亚细胞结构的精细标记。
而 Ci 系列工具鼠凭借mBaojin/mYonghong 的硬核性能,以及轴突靶向基序、多逻辑遗传系统、细胞器靶向标签的设计,轻松胜任这些传统工具 “力不从心” 的研究工作,打开了神经科学研究的新维度。
✦胜任 1:超强化学稳定性,耐受各类组织透明化技术处理
Ci 系列工具鼠依托 mBaojin/mYonghong 的极致化学稳定性,可耐受各类组织透明化技术的严苛化学处理,全程维持荧光强度高度稳定。以用于 wholemount 抗体染色的经典 iDISCO 方法为例,其包含的双氧水处理步骤会让传统 EGFP、tdTomato 基的 Ai 系列报告鼠荧光完全淬灭,而 Ci 系列工具鼠经全套 iDISCO 流程处理后,荧光依旧明亮,为全组织三维成像提供高质量荧光信号支撑。
✦胜任 2:搭载 AxonTag 轴突靶向基序,精准标记神经轴突远端与外周神经
Ci 系列中所有搭载 AxonTag 轴突靶向基序的品系,可将荧光蛋白精准靶向至轴突远端,能更高效、清晰地标记外周神经及神经末梢,完美解决传统工具鼠轴突信号微弱、难以追踪长距离神经投射的痛点。同时该设计具备组织特异性,在非神经组织中仍保持荧光蛋白的胞浆标记特性,满足多组织、多场景的标记研究需求。
✦胜任 3:光镜 - 电镜关联成像(CLEM)专属适配,实现跨尺度精准成像
依托 mYonghong 对四氧化锇(OsO₄)500% 的耐受性提升,Ci 系列工具鼠成为 CLEM 成像的专属适配工具,可在电镜制样的 OsO₄固定步骤中保持荧光稳定,实现光镜精准定位 + 电镜超微结构分析的跨尺度研究,成像信噪比直接提升 20 倍,彻底解决传统荧光工具 “光镜看不清、电镜找不着” 的 CLEM 研究核心痛点。
✦ 胜任 4:超分辨成像,解析亚细胞精细结构
EGFP/tdTomato 的光稳定性较差,无法满足 STED/SIM 超分辨成像的长时间光照要求;而 mYonghong 适配 STED 超分辨,mBaojin 适配 SIM 超分辨,可清晰解析内质网动态、微管 / 肌动蛋白骨架、线粒体形态等亚细胞结构,分辨率远超传统工具。
✦胜任 5:膨胀显微镜成像,实现超高分辨率观测
膨胀显微镜需要对样品进行碱性和酶解处理,传统 EGFP/tdTomato 会在该过程中失活,而mBaojin/mYonghong 具有超强的化学稳定性,可耐受膨胀处理,实现样品膨胀后的高分辨率成像,清晰观察到树突棘、突触小泡等微小结构。
✦胜任 6:耐化学处理,兼容石蜡包埋
在 H&E 染色的乙醇梯度处理实验中,传统 EGFP/tdTomato 在 50% 乙醇中即发生荧光淬灭,而 mBaojin/mYonghong 可耐受梯度乙醇,二甲苯,60都脱蜡等处理,且复水后能部分恢复荧光,传统工具鼠完全无法实现这一点。
Ci 系列工具鼠,神经研究的新一代 “标配”
mBaojin 和 mYonghong 两款新型荧光蛋白,解决了传统荧光蛋白稳定性差、信号弱、单体性不佳的核心问题;而基于此开发的 Ci 系列工具鼠,既在基础研究中完全对标 rosa26-GFP/tdTomato,又能胜任传统工具无法完成的组织透明化、超分辨成像、CLEM、细胞器靶向等先进研究工作。
对于神经科学研究人员而言,Ci 系列工具鼠不仅是 “替代传统工具的新选择”,更是 “突破研究边界的新利器”,助力科研人员在神经连接组学、亚细胞结构解析、活体动态追踪等领域实现更深入的探索。
新一代荧光工具已来,Ci 系列工具鼠,让你的神经研究更高效、更精准、更前沿!
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