探索干细胞治疗的有效性：一份高质量的干细胞评估的三大标准！

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为了确保干细胞的高品质，选择细胞的来源至关重要。随着人体的老化，细胞的活性也逐步下降。不论是采用他人捐赠的细胞进行异体移植，还是使用个体自身的细胞进行自体移植，供体的年龄和健康状况都会显著影响获得细胞的质量。

▲人体骨髓中间充质干细胞随年龄的变化关系

▲20岁的细胞数量  vs  70岁的细胞数量

▲20岁的细胞活性  vs  70岁的细胞活性

2019年，英国利兹大学的科研团队就采集了67名健康供体（19-89岁）的骨髓间充质干细胞，通过体外培养的方式证实了：年轻人的干细胞数量和增殖能力显著高于老年人。

▲在国际细胞专业杂志《Stem Cells International》上发表的相关研究结果

团队招募了19-89岁的67位捐献者进行外周血骨髓间充质干细胞分离。之后首先将捐献者的样本按照19-40岁、41-60岁和61-89岁分为三组，经过对比，结果如以下图所示，相同采血量所分离出的细胞数19-40岁年龄组明显高于另外两组，与之前报道的研究结果相符。

     ⚫️代表男性 ⚪️代表女性

研究者从样本中分出19-37岁和61-76岁两个年龄组利用标准培养基进行培养，以相同时间每个细胞生长的细胞团的面积来评定细胞的增殖活力，结果如下图所示，年轻分组拥有较大生长面积的数目及总量明显多于年老分组，可见年轻细胞拥有更强的增殖能力。

▲不同年龄组细胞生长活力对比

因此，从年龄这一因素出发，脐带、胎盘、羊膜等围产组织所提取的间充质干细胞，因其出生即获取，故被昵称为“零岁细胞”，通常被认为是最佳选择。年轻成人的骨髓和脂肪源间充质干细胞也是较好的选择，因为它们相较于更老年龄段的细胞具有较高的活性和再生能力。对于年龄较大的个体，通常不推荐直接使用自体干细胞进行治疗，因为这些细胞的再生和修复潜能可能已经降低。

▲年轻态的干细胞胞体饱满、呈明显的梭形；衰老的干细胞胞体宽大扁平

此外，供者本身的身体状况也对干细胞有一定影响。

首先供体必须经过检验筛查证明无人源特定病毒（包括HIV、HBV、HCV、HTLV、EBV、CMV等）的感染，无梅毒螺旋体感染。其次除了病毒感染，许多疾病也会影响自体间充质干细胞的功能及效果，如遗传性疾病、自身免疫性疾病和部分慢性疾病等。

以常见的糖尿病为例，2021年9月刊登在《STEM CELLS TRANSLATIONAL MEDICINE（干细胞转化医学）》上的一项研究证实：长期患有2型糖尿病会降低干细胞的增殖能力、免疫抑制潜力及存活率。

▲健康组（第1组）和2型糖尿病患者的自体骨髓来源间充质干细胞（BM-MSCs）的表征对比（糖尿病持续时间：第2组：<5年，组3：5-10年，第4组：>10年）

尽管干细胞治疗2型糖尿病的具有潜在治疗效果，但一些患者使用自体干细胞进行治疗却得到矛盾的结果，这是由于疾病影响了患者自体干细胞的分子和细胞特征，特别是代谢活动和线粒体DNA的改变。

所以，当你患有糖尿病超过10年且较为肥胖时，采用自体干细胞进行治疗就不会是一个明智的选择。

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我们都知道，当干细胞回输到体内，只有活着的干细胞能真正起到修复或治疗的作用，失活细胞不仅有碍有效性，还可能会引发机体毒性反应。

所以细胞活率不但关乎细胞质量，更涉及人体自身的安全。也正因如此，国内监管对于干细胞产品活率要求较高，通常要≥90%。

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人体会衰老，人体内广泛存在的MSC也会衰老（大自然的规律），体外培养的MSC同样会衰老（复制性衰老）。刚从脐带、胎盘等组织提取出来的干细胞是原始P0代，传一代是P1代干细胞，以此类推。在此过程中，干细胞的生物学效力和增殖特性，会随着传代次数的增加逐渐下降。

例如，下图为越南某实验室分离培养的人脂肪间充质干细胞，培养至P10代时，干细胞出现典型的衰老特征，胞体直径增大、宽大扁平，失去了典型的成纤维细胞样的梭形，朝着“煎蛋”形态发展且局部排列紊乱。

▲从P10代开始有明显的衰老

虽然间充质干细胞理论上可以长期传代培养，但衰老干细胞的免疫抑制功能会出现明显的下降，因此在临床应用中不建议选择代次较高的干细胞批次。

但P0代干细胞活性很高，为什么不直接使用它呢？那是因为我们需要综合考虑细胞的剂量与安全性。如果没经过足够的体外培养、扩增，可能导致细胞总数量不够，达不到使用标准。

此外，传代培养的过程还是一个纯化间充质干细胞的过程。刚从组织中被新鲜提取出的P0代干细胞还来不及检测各种污染物的存在情况，也没有进行进一步的净化，有可能存在某些细菌、病毒、微生物等，缺乏安全保障。

目前学界普遍公认，P3-P7代次的干细胞，遗传特性基本稳定，生物学特性虽然有一定的差异，但差异不大，也可以认为基本稳定。所以要同时兼具数量、安全及干细胞活性，P3-P7代次的干细胞是最佳的选择。