Delmic光电联用如何打开Cryo-FIB慧眼、告别盲切Cryo-ET薄片？

挑战：从“盲切”到“导航”

植物样品经高压冷冻后，目标细胞被包裹在厚达数十微米的透明冰中，在电子束下无法直接识别。传统的离子束铣削缺乏定位能力，难以精确切割出包含特定细胞器或连接处的超薄冰片。

研究团队利用Delmic的Meteor集成荧光显微镜与Odemis控制软件，构建了精准的空间定位系统：

1. 宏观筛选：利用荧光显微镜，通过植物组织的自发荧光，快速锁定感兴趣的区域。

2. 原位关联：在双束电镜内，集成荧光模块可在铣削前、中、后多次对同一区域进行成像，将荧光信号（目标位置）与电子束图像（样品形貌）进行像素级精准关联。

3. 深度确定：通过独特的“FIB-view”模式，从离子束角度进行荧光成像，精确判断目标结构在冰层下的深度，确保其被完整保留在最终的超薄冰片中。

图为苔藓的冷冻处理与高压冷冻 (HPF) 的比较

结果：从方法到发现

凭借这一导航系统，该研究实现了：

• 流程成功建立：在苔藓、拟南芥、滨藜等多种植物组织上，稳定制备出高质量冷冻切片。

• 结构成功解析：对叶绿体中的Rubisco酶进行了原位亚纳米分辨率结构解析，并发现其非随机分布的排列特征。

这项研究证明，光电联用技术是解锁复杂多细胞样品，尤其是植物样品，进行冷冻电子断层扫描的必备钥匙。它解决了“看得见”（荧光定位）和“切得准”（FIB加工）的根本矛盾。

为何选择Delmic

此项研究并非简单地使用一台荧光显微镜。它突显了真正深度集成、为关联工作流优化的光电联用系统的不可替代优势：

• 硬件深度集成：Delmic的Meteor集成式荧光显微镜，专为FIB-SEM环境设计，光路与离子束、电子束精准校准，确保荧光图像与电镜图像的空间对应关系精确无误，这是后期精准定位的基础。

• 软件智能控制：其配套软件（如Odemis）实现了对荧光成像、电镜成像和离子束控制的统一协调。研究人员可以直接在关联图像上测量距离、规划铣削图案，将复杂的空间计算转化为直观的操作指令，极大提升了工作效率与成功率。

• 流程无缝衔接：从离机初筛到机上精确定位、深度校准，再到最终的FIB铣削，光电信号始终是贯穿全程的引导线索。Delmic的系统正是为这样连续、闭环的关联工作流程而生，避免了不同设备间转移样品带来的误差和风险。

图为样品筛选和靶向薄片制备

覃思科技作为 Delmic 光电联用（CLEM）系统在中国的唯一代理商，致力于将这一国际领先的研究平台引入国内科研一线，助力生命科学前沿研究。Delmic 提供的并不仅是一套硬件设备，而是经全球顶尖实验室长期验证的、完整而成熟的集成式关联显微解决方案，覆盖从样品制备、精准定位到数据采集与关联分析的lamella milling完整流程，尤其是最新推出的METEOR 2.0系统，进行了多项重要改进和升级，可显著提升复杂生物问题的研究效率与可靠性。

该系统广泛适用于多类生命科学研究方向，包括但不限于：

• 细胞生物学（Cell Biology）：亚细胞结构的精准定位与功能解析

• 神经生物学（Neuroscience）：突触结构与神经功能的相关研究

• 微生物学与感染生物学（Microbiology & Infection Biology）：病毒 / 细菌感染及宿主互作机制

• 细胞器与膜动力学（Organelle & Membrane Dynamics）：自噬、内吞及分泌通路研究

• 发育生物学与模式生物（Developmental Biology）：组织与胚胎中的精确定位分析

• 细胞病理与转化医学（Pathology & Translational Research）：疾病相关超微结构与病理机制研究

通过 Delmic METEOR/METEOR 2.0系统，科研工作者能在同一样品、同一兴趣区域（ROI）内，将“光学看到的功能信号”与“电镜解析的超微结构”精准对应，为细胞生物学、神经科学、感染机制及亚细胞结构研究提供强有力的技术支撑。