1.什么是慢病毒和慢病毒载体
2.慢病毒的基本特点
3.
慢病毒包装的核心原理
慢病毒颗粒的包装需要多个质粒协同作用,通过转染包装细胞(如HEK293T)产生假病毒颗粒(含病毒结构蛋白和目的基因,但无复制能力)。
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质粒系统组成
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包装流程
1).质粒共转染:将转移质粒、包装质粒、包膜质粒共转染至HEK293T细胞。
2).病毒蛋白表达:
Gag:形成病毒衣壳结构。
Pol:提供逆转录酶、整合酶和蛋白酶。
Rev:结合转移质粒中的RRE,促进未剪接的病毒RNA从细胞核转运至细胞质。
VSV-G:替换原病毒包膜,形成假病毒颗粒,增强稳定性和宿主范围。
3).病毒颗粒组装:在细胞膜附近,病毒RNA(来自转移质粒)与Gag/Pol蛋白组装成病毒颗粒,包裹VSV-G包膜后释放到细胞外。
4).感染靶细胞:病毒通过VSV-G与靶细胞膜融合,释放病毒RNA进入细胞,逆转录为DNA后整合到宿主基因组。
5.应用场景
1.基因过表达:将目的基因导入难以转染的细胞(如神经元、干细胞)。
2.RNA干扰(shRNA):构建稳定敲低特定基因的细胞系。
3.CRISPR基因编辑:递送Cas9和sgRNA实现靶向基因敲除或敲入。
4.基因治疗:临床试验中用于递送治疗性基因(如CAR-T细胞改造)。
目标
应用科学技术,让人民的生活更美好。
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素材 | 智普肽德
文案 | 智普肽德
图片 | 智普肽德

