猪瘟防控 | 当前我国非洲猪瘟最新研究进展通报→从源头把控，天然龙脑饲料让猪健康好养

最急性型和急性型发病猪体温高达41--42℃，食欲废绝、精神沉郁、呼吸困难，皮肤充血变红或变蓝色，可发生呕吐、腹泻、甚至血便，偶见便秘。出现症状后1—4天内死亡，也有的未出现症状就死亡，发病仔猪的耳、鼻、唇和腿皮肤发红，发病率和死亡率可达100%。亚急性型病猪出现中度发热，食欲下降，感染猪在7—20天内死亡，死亡率为30%-70%。

ASFV为非洲猪瘟病毒科(Asfarviridae)非洲猪瘟病毒属(Asfivirus)唯一成员. 根据其B646L基因3′端序列差异,ASFV被分为24个基因型;所有基因型均存在于非洲, 而只有基因Ⅰ型和Ⅱ型传出非洲, 随后传入欧洲、美洲及亚洲等国家。

①高致死性基因Ⅱ型Georgia07样非洲猪瘟病毒株：这株毒株是我国首批从国外样品中分离的一株毒，通过对该毒株的研究明确了疫情早期中国流行毒株感染动物的潜伏期、传播力、致病力和发病特点，为中国早期ASF认识以及防控提供了第一手数据。

②低致死性基因Ⅰ型欧洲早期分离株NH/P68样病毒株：该毒株感染一般呈现发病动物病程较长, 死亡率较低, 还伴随着间 歇性发热、体重减轻、慢性皮肤溃疡和关节炎等临床症状，但具有高效传播能力, 造成慢性持续性感染。此类病毒与前期分离的中等毒力基因Ⅱ型自然变异病毒相似, 能造成慢性持续性感染, 受感染的猪只出现低水平且无规律的带毒和排毒现象,且不同个体排毒和带毒方面差异较大，为疫情早期诊断带来许多困难。

③高致死性非洲猪瘟基因Ⅰ型/Ⅱ型重组病毒株：自2021年以来, 中国田间出现了基因Ⅰ型和Ⅱ型病毒的共存。2021年底,赵东明首次证明了ASFV在不同基因型之间可以发生自然重组并产生新的自然重组病毒。通过实验发现, 基因Ⅰ型/Ⅱ型重组病毒株对家猪呈现高致死性特性, 且水平传播能力强,并明显不同于前期分离的基因Ⅰ型弱毒株。此类重组病毒的20个毒力相关基因都来自于基因Ⅱ型强毒株,可能是其毒力增强的重要因素之 一。

多个研究团队都尝试开展了基因缺失弱毒疫苗研究, 其结果表明, DP71L,B119L,DP96R,DP148R,EP402R,MGF360/505、9GL和UK等是ASFV的毒力基因，对这些基因进行单个或者联合缺失, 获得的基因缺失株致病力显著降低, 且能够诱导针对同源强毒攻击的良好免疫保护。

中国多家研究单位都基于中国ASFV流行株开展 基因缺失疫苗研究，构建多株基因缺失病毒，证明了部分基因缺失株具有较好的安全性和有效性。其中有研究表明, ASF候选疫苗HLJ/18-7GD株安全不致病、遗传稳定不返强、攻毒存活保护效力达80%以上, 且突破了ASF弱毒活疫苗规模化生产瓶颈，又在后续得到了国家成面的大力支持。但同时基因Ⅰ型/Ⅱ型重组病毒的出现与流行，又给中国ASF疫苗研制带来新的挑战。

我国已在第一时间遴选出一批质量可靠的ASF现场快速检测试剂盒。但随着自然变异弱毒株的出现,已有33个具有良好的特异性和敏感性的ASFV抗体检测试剂盒都顺利通过应急评价,获得生产销售许可。“非洲猪瘟病毒ELISA 抗体检测试剂盒”已获得国家二类新兽药注册证书。

此外,一种具有高度免疫原性的ASFV P22蛋白也被研制出, 基于P22蛋白制备单克隆抗体, 建立了一种能检测基因Ⅰ型和Ⅱ型非洲猪瘟病毒抗体的阻断ELISA(blockingenzymelinkedimmunosorbent assay, bELISA)方法。该方法敏感、特异且重复性好,比商用的非洲猪瘟病毒P72抗体ELISA检测试剂盒 检出抗体时间更早、更准确。

此外，我国团队针对ASFV适应的细胞系BK2258的研究也有新进展。此外，我国团队针对ASFV适应的细胞系BK2258的研究也有新进展, ASFV在BK2258中能良好增殖, 病毒滴度可达107 TCID50/mL以上,可形成明显的细胞病变，并基于BK2258建立了检测ASFV抗体的IFA(immunofluorescence assay)方法。该IFA与ASFV阳性血清反应可见明亮的成簇的特异性绿色荧光灶,非常易于观察，且该IFA检测方法为ASF血清确诊及不同血清学诊断方法比对提供了金标准。