子宫颈癌二级预防的筛查技术
宫颈癌是常见的女性恶性肿瘤，近年来宫颈癌发病率持续增高并呈现年轻化趋势。宫颈癌的主要致病原因是高危型人乳头瘤病毒（HPV）持续感染，通过接种HPV疫苗、宫颈癌筛查、及时治疗宫颈癌及癌前病变等三级预防措施能够有效防控并最终实现消除宫颈癌。
针对人群进行筛查是预防和减少子宫颈癌发病率和死亡率的主要措施。理想的筛查方法是能够最大限度地筛查出疾病，能具有客观且灵敏度与阴性预测值高等优势；也要尽可能减少对筛查人群造成的伤害，也就是要有较好的特异性，另外也需要易于操作，符合卫生经济学要求等条件。目前，我国子宫颈癌筛查指南中的方法学主要有细胞学检查、HPV检测和醋酸肉眼观察。
细胞学
由于子宫颈癌的解剖学位置特殊，能在直视下检查，且癌瘤组织代谢比正常组织高，其凝聚力较正常组织低10倍，异常细胞之间的亲和力比正常细胞弱，使得异常细胞易于脱落，所以通过检查子宫颈脱落细胞，发现异常细胞即可作出初步诊断。细胞学筛查已成为子宫颈防癌普查首选的初筛工具之一。
细胞学的优势为简便易行、无创等。但细胞学筛查需要建立高质量的细胞学检查系统，需要配置设备和能熟练阅片的细胞学技术人员，加之筛查结果的判断主观性较强，取样、制片和阅片等环节中影响因素多，因此细胞学筛查的灵敏度尚不尽人意。虽然子宫颈涂片细胞病理学检查可以发现大部分子宫颈浸润癌及癌前病变，但是脱落细胞的特征与活体细胞的特征不完全相同，且无组织结构，故脱落细胞涂片检查只能作为初筛，不能作为最后诊断的依据。确诊需依靠阴道镜下子宫颈活组织病理学检查。由于细胞学筛查存在着技术上的瓶颈，因此，只有在严格的质量控制下，细胞学筛查的准确性才能得到保证。在无细胞学筛查基础或基础差的地区，短时间内难以广泛推广和有效应用。
1941年提出了子宫颈/阴道细胞涂片的巴氏染色及分级法。但是传统巴氏涂片检测检出子宫颈病变的假阴性率高达5%~29.7%。液基薄层细胞检测技术（liquid-based cytologic test，LBC）应运而生，该方法比传统涂片提高了高度和低度子宫颈上皮内病变的检出率。但仍容易造成漏诊或对细胞涂片判读错误。针对这些问题，为提高检出率细胞学自动阅片系统应运而生。随着科学技术的不断完善和发展，越来越多的高新技术将不断应用于子宫颈病变诊断。
表1 两种细胞学检测技术的优缺点
HPV检测
1. HPV检测方法
HPV是乳头瘤属的一类特异感染人皮肤和黏膜的双链闭合环状DNA病毒。HPV目前是不能够被体外培养的，因此针对HPV的检测都是针对其病毒核酸进行的，包括针对HPV病毒的DNA和mRNA的检测。HPV的检测技术可以分为两大类：靶标扩增技术和信号放大技术。
（1）靶标扩增技术
1）通用引物聚合酶链反应法（polymerase chain reaction，PCR）：该检测技术是通过设计特定引物，对不同型别的HPV DNA片段进行扩增，达到检测目的。该技术具有价格低廉、易于操作的特点。但不同的引物，实现的检测目的不同，检测的敏感度和特异度不同。
2）荧光定量聚合酶链反应法（fluorescent quantitative polymerase chain reaction，FQPCR）：该方法采用针对某个HPV型别的特异引物及探针扩增HPV DNA序列。这种检测方法有较高的灵敏度和特异度，既可以检测病毒载量，也可以检测HPV的具体型别。但该检测方法每个反应只能检测1种HPV型别，如需检测多个型别，则要在不同的反应体系中进行。
3）聚合酶链反应法的延伸应用：聚合酶链反应法除了可以针对HPV DNA进行检测，也可以针对HPV病毒的mRNA来进行，该方法与HPV DNA检测相比具有更好的灵敏度和特异度。
聚合酶链反应法也可以先使用HPV通用引物进行扩增，然后再对扩增产物进行分析，来确定HPV的具体型别。导流杂交法（HybriMax）就是集导流杂交与基因芯片技术的优势于一体，能同时对21种HPV基因进行快速分型，且可判断多重感染。流式荧光杂交技术亦称为液相芯片技术，可以检出13种型别的HPV基因并能够同时对其具体分型判断多重感染。该检测方法为一种高通量的检测技术，速度与固相杂交相比较快，但对设备的要求较高，花费也较大。
（2）信号放大技术
信号放大技术是指在HPV检测中，不扩增HPV的DNA或RNA，而是放大与HPV DNA结合的化学信号，来达到检测的目的。HC2技术是首个获得美国FDA认证的HPV检测方法，是一种采用免疫技术并通过化学发光使信号放大的检测方法，可以检测13种HPV，进行定性和半定量测定，但不具体区分型别。与传统的HPV检测方法相比，该方法的优点在于操作简便易行，对取样人员及实验室条件要求较低，检测时间较短。
2.HPV检测与子宫颈癌筛查的临床应用
（1）单独用于子宫颈癌的一线筛查：2021年，WHO发布的《子宫颈癌癌前病变筛查和治疗指南（第2版）》，推荐HPV检测作为一般女性子宫颈癌一线筛查的首选，建议女性从30岁开始筛查，每间隔5~10年采用HPV筛查一次。
（2）HPV检测联合细胞学用于子宫颈癌的一线筛查：ACS（2020版）指南包含了全新的策略指导，细胞学筛查策略作为确定合理风险的基线，HPV检测和细胞学联合筛查具有很好的敏感性和特异性，从而减低了假阳性风险。
（3）HPV检测用于细胞学ASC-US分流：不能明确诊断意义的非典型鳞状细胞（atypical squamous cells of undetermined significance，ASC-US）是一类描述性诊断，是指细胞的异常较反应性改变更明显，但未达到鳞状上皮内病变的程度，无法由细胞形态对其进行明确分类。研究发现，以HPV检测对ASC-US患者进行分流时，HPV阳性患者再进行阴道镜检查，可以降低阴道镜检查率并具有较高的宫颈病变检出率。
一米生物的自采集宫颈刷获欧洲CE认证。标志着一米生物在宫颈癌领域的产品质量和安全性得到了国际认可。该宫颈刷可采集脱落的宫颈细胞，所采集的细胞可用于HPV分型检测和HPV甲基化检测，助力宫颈癌筛查。
已获CE证书
资料来源
《中国子宫颈癌三级规范化防治蓝皮书》，人民卫生出版社
参考文献
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