徕卡BOND RX自动化多重免疫荧光染色方案，助力肿瘤微环境研究（四）！

近年来免疫治疗药物（如 PD1、PD-L1 单抗）广泛应用，成为癌症治疗重要疗法。分析肿瘤微环境（TME）对发现治疗靶点及生物标志物意义重大。TME是肿瘤细胞生活的内环境，含多种细胞和非细胞成分，随肿瘤进展演变，且其组成和功能状态存在差异，研究可为肿瘤治疗提供新思路。

多重免疫荧光技术可检测TME中标志物表达，分析细胞数量及空间分布，助力研究肿瘤机制、寻找生物标记物。徕卡BOND RX系统提供自动化多重免疫荧光染色方案，助您便捷高效开展实验。

本期为您介绍：免疫检查点检测方案，数据及图片来源@徕卡生物科技。

免疫检查点（Immune Checkpoint）是一类免疫抑制性分子，在免疫细胞上表达，能调节免疫激活程度，对防止自身免疫作用的发生起着重要作用。在肿瘤的发生、发展过程中，免疫检查点成为免疫耐受的主要原因之一。肿瘤细胞会表达一些分子来激活免疫检查点，使抗原不能被呈递至T细胞，阻断了肿瘤免疫中的抗原呈递过程，从而抑制T细胞的免疫功能，肿瘤细胞则逃脱免疫监视并存活下来。常见的免疫检查点分子有 PD-1、CTLA-4、TIM3、LAG3、TIGIT、VISTA、SIRPα 等。

PD-1⁺、CD8⁺双阳性细胞与肿瘤区域的空间位置分布：以肿瘤结构区域为中心，微米级别精度对肿瘤周边浸润区域微环境中PD-1⁺细胞、CD8⁺T淋巴细胞双阳性的细胞进行空间分布距离的量化分析，不同颜色代表PD-1⁺细胞、CD8⁺T淋巴细胞双阳性细胞距离肿瘤结构的不同距离范围。大部分PD-1⁺细胞、CD8⁺T淋巴细胞双阳性细胞在肿瘤区域0–50 um距离范围内，随着与肿瘤距离的提升，相互作用关系的细胞逐渐减少。

PD-1⁺、CD8⁺、LAG3⁺、 TIM3⁺ 在肿瘤区域附近的分布及空间相互关系：通过聚类模式分析 CD8⁺T细胞不同亚型的相互作用关系，并以连线示意。大部分CD8⁺/PD-L1⁺细胞的作用聚类关系处于CD8⁺细胞作用关系之内，在CD8⁺细胞的聚类边缘较少分布。

[1] Arsen Osipov, May Tun Saung, Lei Zheng, et al. Small molecule immunomodulation: the tumor microenvironment and overcoming immune escape. J Immunother Cancer. 2019 Aug 22;7(1):224. doi: 10.1186/s40425-019-0667-0.