徕卡病理全流程解决方案
助力抗肿瘤免疫研究
肿瘤免疫治疗(以免疫检查点抑制剂ICBs为代表)已取得显著临床成功。然而,仍有大量患者对该疗法无响应,其低应答率部分源于肿瘤浸润淋巴细胞(TILs)的耗竭,最终导致其无法控制肿瘤进展。终末耗竭 CD8⁺ TILs(PD-1⁺TIM-3⁺)虽具杀伤肿瘤能力,但无法响应现有疗法。肿瘤微环境的代谢限制(如缺氧、低糖)加剧了T细胞功能缺陷。
Metabolic reprogramming of terminally exhausted CD8+ T cells by IL-10 enhances anti-tumor immunity 发表于Nature Immunology(IF 27.7)。该研究发现,IL-10–Fc融合蛋白通过增强终末耗竭CD8⁺ TILs的线粒体氧化磷酸化(OXPHOS),显著促进其增殖和细胞毒性。机制上,IL-10–Fc 通过线粒体丙酮酸载体(MPC)依赖性途径提升T细胞代谢活性,与过继性T细胞治疗(ACT)联用可完全清除小鼠实体瘤并诱导长期免疫记忆。研究首次揭示IL-10–Fc独立于祖细胞耗竭T细胞的作用模式,为代谢干预增强抗肿瘤免疫提供了新思路。
免疫荧光染色技术在本研究中用于验证T细胞浸润和亚群分布,还通过可视化线粒体功能变化,为IL-10–Fc的代谢调控机制提供了关键证据。其高分辨率和特异性定位能力,使研究人员能够直接观察治疗后肿瘤微环境的动态变化,从而支持了IL-10–Fc作为代谢干预手段的创新性结论。
各组样本代表性免疫荧光图像
本实验中免疫荧光染色切片制备:
1
组织固定:肿瘤组织用4%多聚甲醛固定过夜
2
组织脱水及石蜡包埋:固定后的组织经脱水,再通过石蜡包埋为石蜡块
3
切片制备:石蜡块切成4 μm厚的切片
4
抗原修复与免疫荧光染色:
- 切片经脱石蜡和水化处理
- 用抗CD3抗体(SP7克隆,Abcam,1:150稀释)孵育
- Alexa Fluor 488标记的山羊抗兔IgG二抗染色
- DAPI 复染细胞核
在病理组织处理流程中,从生物样本的获取开始,经过组织脱水、组织包埋,再到样本切片(包括石蜡切片、冷冻切片等多种方式)、摊片、烤片,以及后续的组织染色(涵盖常规染色、免疫组化等技术)和扫描成片等一系列步骤,徕卡生物可为病理学实验室提供一站式的全流程解决方案,确保每一步操作达到高标准的质量要求,为精准诊断和研究提供有力支持。
参考文献
Guo Y, Xie YQ, Gao M, et al. Metabolic reprogramming of terminally exhausted CD8+ T cells by IL-10 enhances anti-tumor immunity. Nat Immunol. 2021 Jun;22(6):746-756. doi: 10.1038/s41590-021-00940-2.
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