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PCR实验室有哪些工作区?

PCR实验室有哪些工作区? 程泉智能
2023-05-06
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导读:PCR实验室又叫做基因扩增实验室。PCR扩增检验实验室原则上划分为四个独立的工作区:试剂贮存和准备区、标本制备区、扩增反应混合物配制及扩增区、扩增产物分析区。为了避免交叉污染,进入各个工作区域必须严格

PCR实验室又叫做基因扩增实验室。PCR是聚合酶链式反应(Polymerase Chain Reaction)的缩写。这是一种分子生物学技术,用于放大特定的DNA片段,可以被看作生物体之外的特殊DNA复制。通过DNA基因追踪系统,可以快速准确地掌握患者体内的病毒含量,其精确度高达纳米级别。


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PCR实验室建设标准规范

  • 《生物安全实验室建筑技术规范》GB50346-2004

  • 《洁净厂房设计规范》GB50073-2013

  • 《洁净室施工及验收规范》GB50591-2010

  • 《实验室生物安全通用要求》GB19489-2008

  • 《室内空气质量标准》国家标准GB/T18832002

  • 《基因检验实验室技术要求》国家质监检验总局SN/T1193-2003



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PCR实验室设计的原则


图源 | 程泉洁净

各区独立

PCR实验室的四个区,应该是物理上完全分开的各自独立的区域,并且不能有通过连通各区的中央空调、分区装修隔断不密封、传递窗不密封等发生空气直通的现象。

注意风向

检测中的吸取,就会因为“产物气溶胶”的形成及扩散,而极容易对以后新的扩增反应产生“污染”,为了防止这种污染的发生,就需要在对基因扩增检验实验室进行严格分区的同时,还要注意实验室内空气杂不同的流向。

因地制宜

PCR实验室不可能是千篇一律的,必须要具体情况具体分析;新建实验室可以做得尽可能合理和规范,并且易于实验室的管理。

方便工作

方便检测工作有效进行。



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PCR实验室安全注意事项


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  1. 与室外联系的可视电话应放置在显眼位置,并且放置在便于实验室人员快速拿起的位置;

  2. 实验室门口位置设置紧急洗眼器和紧急喷淋,有效防止实验人员受到伤害;

  3. 实验室内的通讯设备设施应该放置于生物安全柜对面;

  4. 实验室应该具有防止昆虫和其他生物进入的措施;

  5. 实验室内的压力显示器和报警装置都应放置在醒目位置;

  6. 生物安全柜的摆放位置不易摆放在与出入口紧邻的墙体上;

  7. 高压灭菌器与传递窗紧邻。



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PCR实验室由哪些区域组成?


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PCR扩增检验实验室原则上划分为四个独立的工作区:试剂贮存和准备区、标本制备区、扩增反应混合物配制及扩增区、扩增产物分析区。为了避免交叉污染,进入各个工作区域必须严格遵循单一方向进行,即只能从试剂贮存和准备区→标本制备区→扩增反应混合物配制和扩增区→扩增产物分析区。


在实验区域间,应采用传送窗将试剂和样品传送。原则上的四大区域应注意正压和负压的控制。


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试剂准备区

主要进行试剂的制备、分装和主反应混合液的制备。试剂和用于样品制作的材料应直接运送至该区,不得经过其它区域。试剂原材料必须贮存在本区内,并在本区内制备成所需的试剂。


本区主要设备有天平、冰箱、离心机、加样器、振荡器等。对于气流压力的控制,本区并没有严格的要求。

样品准备区

主要进行样品的保存、核酸(RNA、DNA)提取、贮存及其加入至扩增反应管和测定DNA的合成。本区主要设备有冰箱、生物安全柜、离心机、加样器、振荡器、恒温水浴等。


本区的压力梯度要求为:相对于邻近区域为正压,以避免从邻近区进入本区的气溶胶污染。

扩增区

该区域的功能是DNA扩增和扩增片段的测定。该区域的设备主要是核酸扩增热循环仪、加样器、超净台等。其中热循环仪的电源应专用,并配备一个稳压电源或UPS,以防止由于电压的波动对扩增测定的影响主要进行DNA扩增。


本区的压力梯度要求为:相对于邻近区域为负压,以避免气溶胶从本区漏出。

分析区

本区的压力梯度的要求为:相对于邻近区域为负压,以避免扩增产物从本区扩散至其它区域。



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