文章来源»
血小板是直径 2~4 μm 的无核血细胞成分,在人类血液循环中寿命为 7~12 天,除核心止血功能外,还广泛参与免疫调节、炎症反应、肿瘤转移、创面愈合及组织再生等多种生理与病理过程 [1-6]。近年来,随着血小板生物学研究的深入,学界对其形成、功能、遗传学及信号转导机制有了更新认知 —— 血小板活化由黏附受体(如整合素 α6β1、α2β1、αⅡbβ3 及 GPⅠb-Ⅴ-Ⅸ 复合物)与配体(胶原、血管性血友病因子等)相互作用启动 [7],激活后分泌的生长因子、细胞因子、趋化因子等,可通过调控细胞迁移、分化、增殖及新血管形成,参与创面愈合的关键阶段 [8-9]。
(一)创面愈合的生理过程与临床需求
创面愈合是多细胞协同参与的复杂过程,分为止血、炎症、增殖和组织重塑四个阶段:创面形成后,暴露的内皮、胶原蛋白及组织因子激活血小板,促使其脱颗粒释放因子并形成血凝块以实现止血 [10],后续阶段则依赖多种细胞与因子的动态交互。若创面愈合过程被打乱,经 4~12 周常规治疗仍无愈合趋势,即称为慢性创面 [11]。
慢性创面给患者与医疗系统带来沉重负担:2019 年美国医疗保险人群中慢性创面患者达 1050 万,治疗费用约 225 亿美元 [12];随着人口老龄化与 2 型糖尿病患者增加,创面不愈合病例数持续上升,因此开发新的循证治疗方案成为当务之急。而血小板衍生制品因能补充创面愈合所需的生物活性因子,成为现有治疗的重要补充 [14]。
(二)血小板衍生制品的分类与来源
目前血小板衍生制品尚无统一分类标准,根据制备流程中是否含抗凝剂、是否激活及裂解,可分为三大类,其核心差异体现在形态、成分及释放机制上(表 1):
富血小板血浆(PRP):指血小板计数高于外周血的血浆,1977 年由 HARKE 等 [17] 首次从全血中分离,最初用于血小板减少症输血治疗,后在心脏外科手术中显效 [16]。按是否含白细胞可分为纯 PRP(P-PRP)与含白细胞 PRP(L-PRP)[18],经凝血酶、胶原或钙剂激活后可形成血小板凝胶(PG)。其制备方式包括血袋法、套装法、试管法及单采法 [19],但因制备方式差异,血小板含量、红细胞 / 白细胞残留量不一,且缺乏质量控制标准,为此国内专家已基于现有技术与法规撰写自体 PRP 制备的专家共识 [20]。
富血小板纤维蛋白(PRF):将不含抗凝剂的血液经离心激发凝血级联反应,形成富含血小板的胶状纤维蛋白凝胶 [21]。其中纤维蛋白作为三维生物支架,可让激活的血小板缓慢释放因子,持续促进组织修复;按是否含白细胞或离心条件,可进一步细分。
血小板裂解液(PL):通过激活、裂解、离心、过滤单采血小板或 PRP,促使血小板颗粒与膜性结构中的修复成分充分释放而成 [22]。PL 不仅可替代胎牛血清用于细胞培养,还能通过控制炎症、促进细胞增殖分化,用于组织修复治疗 [23],近年来其相关生物活性材料研究已成为热点 [24]。
从来源看,血小板分为自体与异体两类:自体 PRP 因无需配型、无感染及免疫反应风险,应用最为广泛;而异体来源(健康供者外周血、健康脐血 [26-27])则适用于老人、儿童、严重创伤者、血小板功能异常者及需大量 PRP 治疗的患者 [28]。异体 PRP/PG 的制备需遵循严格检测程序,如脐血需满足 “体积>50 mL、血小板计数>150×10⁹/L、有核细胞数<1500×10⁶/L、无冷冻保存剂” 等条件 [27],现有研究已证实其安全性与有效性,应用前景良好 [29-34]。
(三)血小板生长因子的生物学作用与研究证据
创面愈合中,血小板释放的生长因子(GFs)是核心作用介质,包括血小板衍生生长因子(PDGF)、血管内皮生长因子(VEGF)、转化生长因子 -β(TGF-β)、表皮生长因子(EGF)、碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)等 [35],这些因子通过诱导细胞迁移、增殖、分化及趋化,弥补单一 GF 修复效果不佳的缺陷(表 2)。目前关于血小板衍生制品的研究已覆盖动物实验与临床应用,证实其显著疗效:
1. 动物实验:多组织创面修复显效
PRP、PRF、PL 在动物皮肤 [41-48]、牙槽 [49]、软骨 [50]、骨 [51]、肌腱 [52]、神经 [53] 等组织损伤修复中均有深入研究:小鼠皮肤损伤实验显示,PRP 可提高创面 M2 型巨噬细胞比例,调节炎症并加速愈合 [57];同时 PRP 能增加早期创面抗拉强度 [42]、减轻疼痛 [45],且通过分泌 CXCL4、CXCL7 等趋化因子及 HBD-1、HNP-1 等抗菌肽,对金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌及耐甲氧西林金黄色葡萄球菌感染创面有修复作用 [45,58-60],无需等待感染完全清除即可应用。
此外,PRP 与间充质干细胞(MSC)联合使用,可显著增加创面 CD34 + 细胞与 bFGF 含量,促进创面闭合与上皮化 [48];PRP/PRF 与壳聚糖、透明质酸、氧化海藻酸等材料结合,或利用纳米技术实现因子缓释 [41,43,47,53,60-63],可进一步拓展应用场景(表 3)。
2. 临床研究:多场景治疗安全经济
基于“简单、安全、低成本、微创” 的优势,血小板衍生制品已广泛用于临床,包括糖尿病足溃疡(DFU)[65-67]、感染性骨缺损 [68]、藏毛窦 [69]、高危剖宫产 [70]、全髋置换 [71]、眼睑成形 [72]、口腔黏膜损伤 [27,78] 等,对大疱性表皮松解症(EB)及慢性移植物抗宿主病(cGvHD)导致的少见创面亦有疗效 [77-78]。
临床数据显示:PRF 或钙离子激活的 PRP 呈胶体状,可持续释放因子并减轻疼痛 [74,80];PRF 与透明质酸联用效果优于单独使用 [66];荟萃分析证实 PRP 可促进急慢性创面愈合,降低急性创面感染风险 [81]。此外,血小板衍生制品还能显著降低治疗成本 —— 老年顽固性溃疡采用异体 PG 治疗的费用,兼具临床与经济价值。

