工
概 述
纽甜作为一种人工合成的功能性甜味剂，是目前性能较好且无安全隐患的甜味剂之一，只要按照规定，适量添加到食物中，其对机体的健康基本无危害。
2025食品新国标更新了纽甜的检测方法，华谱生物按照新国标要求，加标回收率在80%-100%，符合GB 5009.247-2025对分析方法准确度的要求。
【标准曲线的配置】
移取适量标准工作溶液（100μg/mL），配制标曲系列浓度为：
0.5μg/mL、1μg/mL、5μg/mL、10μg/mL、50μg/mL、100μg/mL。
【样品提取】
1.含胶基的糖果、果冻及鸡精等试样
称取果冻5g(精确到0.01g)于50mL离心管中，加入25ml混合提取液，于60℃水浴振荡30min。冷却至室温，用甲酸或者20%氨水溶液调pH至4.5，超声30min。加入1ml亚铁氰化钾溶液(92g/L)和1ml乙酸锌(183g/L)，涡旋混匀，4000 r/min离心5min。上清液转移至50ml容量瓶。残渣加入20ml混合提取液，振荡5min，4000 r/min离心5min，合并上清液，用混合提取液定容至刻度，作为试样提取液待净化。
2.油脂类调味料、巧克力及奶油等试样
准确称取5g试样(精确到0.01g)于50ml离心管中，加入25ml混合提取液，于60℃水浴振荡30min。加正己烷，振荡5min，4000 r/min离心5min，弃去正己烷层。用甲酸或者20%氨水溶液调pH至4.5，超声30min。加入1ml亚铁氰化钾溶液(92g/L)和1ml乙酸锌(183g/L)，涡旋混匀，4000 r/min离心5min。上清液转移至50ml容量瓶。残渣加入20ml混合提取液，振荡5min，4000 r/min离心5min，合并上清液，用混合提取液定容至刻度，作为试样提取液待净化。
3.其余试样
准确称取5g试样(精确到0.01g)于50ml离心管中，加入25ml混合提取液，涡旋5min。用甲酸或者20%氨水溶液调pH至4.5，超声30min。加入1ml亚铁氰化钾溶液(92g/L)和1ml乙酸锌(183g/L)，涡旋混匀，4000 r/min离心5min。上清液转移至50ml容量瓶。残渣加入20ml混合提取液，振荡5min，4000 r/min离心5min，合并上清液，用混合提取液定容至刻度，作为试样提取液待净化。
甲酸-三乙胺缓冲液：分别吸取0.8ml甲酸和2.5ml三乙胺，加水定容至1L，pH约为4.5。
混合提取液：量取甲醇400ml至1L烧杯，加500ml甲酸-三乙胺缓冲液，用甲酸调pH至4.5，转移至1L容量瓶，用甲酸-三乙胺缓冲液定容至刻度。
亚铁氰化钾(92g/L)：称取10.6g亚铁氰化钾，加入适量水溶解，用水定容至100ml。
乙酸锌(183g/L)：称取11g乙酸锌，加入适量水溶解，加入1.5ml冰乙酸，用水定容至50ml。
【净化】 HPSW HLB（500mg/6mL）
①活化：6ml甲醇、6ml水
②上样：加样液10ml，弃去；
③淋洗：5ml甲酸-三乙胺缓冲液，弃去；抽干小柱
④洗脱：加8mL混合洗脱液洗脱，收集洗脱液并洗脱液于60℃氮吹浓缩至约1ml，用甲酸-三乙胺缓冲液定容至2 mL，混匀，过0.22μm亲水PTFE滤膜，上机。
混合洗脱液：量取甲醇400ml至1L容量瓶，用甲酸-三乙胺缓冲液定容至刻度。
【参考仪器条件】
仪器：液相色谱Shimadzu LC-16
色谱柱：HPSW AQ-C18(4.6mm×150mm,5μm)
检测器：紫外检测波长：210nm
流速：1ml/min进样体积：50μL
柱温：30℃
流动相B:乙酸铵溶液(20mmol/L)，称取1.54g乙酸铵，用500ml水溶解，加入1.0ml冰乙酸，加水定容至1L。
洗脱条件：
【实验结果】
加标水平浓度：1mg/kg（5μg/mL）
图1-标准色谱图
图2-果冻加标色谱图
图3-果冻色谱图
【注】
①对于较简单的基质，本应用选择不加沉淀剂，不过滤纸，采用高速离心的方式使样液澄清。
②试样提取时请严格按照国标要求调节溶液pH。
关于华谱生物
华谱生物科技（重庆）有限公司是一家致力于实验室耗材研发、生产、销售、服务为一体的高新技术企业，也是同时实现色谱填料和筛板样品前处理耗材的生产商。产品广泛应用于各大科研院所、各省市计量院、疾控中心、环境监测站、食品检测公司等。
华谱生物主要产品包括：固相萃取柱、筛板、色谱柱、小柱柱管、QuEChERS（净化管、盐包、陶瓷均质子）、真菌毒素免疫亲和柱、样品瓶盖垫、针式滤器、配套各厂家原子吸收的石墨管和微波消解的消解罐。
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