展青霉素是一种由多种真菌在水果和果汁中产生的次级代谢产物，具有潜在的毒性，对人体健康存在一定危害。它常见于苹果及其制品中，因此对展青霉素的检测非常重要，以保证食品安全性。《GB 5009.185-2016 食品安全国家标准 食品展青霉素的测定》第二法高效液相色谱法，使用HPSW 228多功能净化柱（配套玻璃试管），其优点操作简便，回收率好，适用于苹果为原料的水果及其果蔬汁类和酒类食品中展青霉素含量的测定。
本次实验使用基质为饮料-青苹果汁。
【标准溶液的配制】
配制浓度为100μg/mL标准储备液，然后配制1μg/mL的标准工作液。
【试液配制】
乙酸溶液：取10mL乙酸加入250mL水，混匀。
【样品提取】
液体试样:
称取4 g试样（精确至0.01 g）至50mL离心管中，加入21mL乙腈，混合均匀，在6000r/min下离心5min，待净化。
【净化】 HPSW 228多功能净化柱
（1）向玻璃试管中加入10mL样品提取液；
（2）将净化柱橡胶头从试管顶端插入试管中，向下压净化柱至试管低端；
（3）将净化柱上部净化后样液取出至试管中；
（4）取5mL净化后样液，加入20μL乙酸，40℃水浴氮吹至近干，加入1mL乙酸溶液复溶，涡旋混匀后，过亲水PTFE滤膜上机测定。
【参考仪器条件】
仪器：液相色谱Shimadzu LC-16
色谱柱：HPSW AQ-C18(250mm×4.6mm,5μm)
检测器：紫外
检测波长：276nm
流速：0.8ml/min
进样体积：100μL
柱温：40℃
流动相：A为0.1%磷酸溶液，B为甲醇洗脱条件：
【实验结果】
加标水平浓度：50ng/mL
基质加标回收率数据
图1-标准溶液图
图2-样品加标图
图3-样品图
【注意事项】
色谱柱使用的AQ-C18(250mm×4.6mm,5μm)，因为短柱AQ-C18(150mm×4.6mm,5μm)目标峰展青霉素（保留时间9min左右）与杂质分离效果不好，容易出现假阳性，选择色谱柱AQ-C18(250mm×4.6mm,5μm)能使目标物与杂质分离度更好，避免假阳性。
关于华谱生物
华谱生物科技（重庆）有限公司是一家致力于实验室耗材研发、生产、销售、服务为一体的高新技术企业，也是同时实现色谱填料和筛板样品前处理耗材的生产商。产品广泛应用于各大科研院所、各省市计量院、疾控中心、环境监测站、食品检测公司等。
华谱生物主要产品包括：固相萃取柱、筛板、色谱柱、小柱柱管、QuEChERS（净化管、盐包、陶瓷均质子）、真菌毒素免疫亲和柱、样品瓶盖垫、针式滤器、配套各厂家原子吸收的石墨管和微波消解的消解罐。
｜华谱生物｜实验室耗材一站式服务商｜
联系我们：023-6312 3060
官网：www.huapushengwu.com
