高效液相色谱法测定吲达帕胺有关物质- 大数跨境

悟空仪器

2024-12-13

今年，《中国高血压防治指南（2024年修订版）》时隔6年后首次更新。新版《指南》显示，中国人群高血压患病率持续上升，中青年人群及农村地区高血压患病率上升趋势更明显。调查显示，在我国，高血压的患病率达到27.5%，患者数量接近3亿。1991-2015年间，20-39岁的青年高血压患病率增加了144.4%。有专家认为，这多数与不良生活方式密切相关，如久坐不动、快餐文化、肥胖、睡眠不足等。

吲达帕胺为磺胺类利尿剂，具有利尿和钙拮抗作用，是一种强效、长效的降压药。使用K2025高效液相色谱仪可对吲达帕胺有关物质进行测定。

实验方案

色谱条件

色谱柱：C₁₈色谱柱，4.6×250 mm，5 μm或者相当的色谱柱；

流动相：准确量取甲醇450 mL、水550 mL和冰醋酸1 mL，混匀，超声后备用；

流速：1.0 mL/min；

进样量：20 μL；

洗针液：甲醇-水=90：10；

柱温：40℃；

检测器及检测波长：紫外-可见光检测器或二极管阵列检测器，检测波长均为240 nm；

采集时间：记录色谱图至主成分峰保留时间的3倍。

实验结果

1、系统适用性溶液色谱图

按照色谱条件进行采集，系统适用性溶液的色谱图如图1所示，积分结果如表1所示。

图1 系统适用性溶液的色谱图

表1 系统适用性溶液色谱图积分结果

目标物	吲达帕胺	降解产物
保留时间（min）	12.500	15.650
峰面积（mAU.s）	735.845	105.845
峰高(mAU)	46.903	5.822
理论塔板数	14909	17183
分离度	-	7.10
对称/拖尾因子	1.10	1.11
相对保留时间	-	1.25

由表1中数据可知，吲达帕胺的保留时间为12.500min，吲达帕胺降解产物的保留时间为15.650min，两者的相对保留时间为1.25，满足《中国药典（2020年版）》二部中对吲达帕胺峰保留时间的要求；吲达帕胺降解产物与吲达帕胺峰之间的分离度为7.10，满足《中国药典（2020年版）》二部中吲达帕胺降解产物与吲达帕胺峰之间的分离度应大于6.0的要求。

2、对照溶液色谱图

对照溶液的色谱图如图2所示，积分结果见表2。

图2 对照溶液的色谱图

表2 对照溶液色谱图积分结果

目标物	吲达帕胺
保留时间（min）	12.417
峰面积（mAU.s）	310.767
峰高(mAU)	20.160
理论塔板数	15226
分离度	-
对称/拖尾因子	1.10

将对照溶液连续进样7针，叠加的色谱图如图3所示，结果见表3。

图3 对照溶液连续进样7针叠加的色谱图

表3 对照溶液连续进样7针重复性数据统计

目标物	吲达帕胺
项目	保留时间（min）	峰面积（mAU.s）
1	12.417	310.767
2	12.408	309.687
3	12.392	310.165
4	12.392	309.755
5	12.383	308.772
6	12.383	308.737
7	12.392	308.159
平均值	12.395	309.435
RSD%	0.10	0.30

由表3中数据可知，对照溶液连续进样7针重复性测试，吲达帕胺保留时间的RSD为0.10%，峰面积的RSD为0.30%，具有良好的定性定量重复性。

3、供试品溶液色谱图

供试品溶液的色谱图如图4所示，积分结果见表4。

图4 供试品溶液的色谱图

表4 供试品溶液色谱图积分结果

目标物	吲达帕胺	降解产物	最大单杂	总杂
保留时间 (min)	12.500	15.583	9.392	-
峰面积 (mAU.s)	30711.216	20.007	12.964	32.971
峰高 (mAU)	2052.886	1.086	1.284	-
理论塔板数	16699	16792	20810	-
分离度	9.61	7.11	5.46	-
对称/拖尾因子	9.61	1.05	1.15	-

由表4中数据可知，吲达帕胺降解产物的峰面积为20.007mAU.s，最大单杂的峰面积为12.964mAU.s，均小于对照溶液主峰面积的0.5倍（155.384mAU.s）；总杂峰面积为32.971mAU.s，小于对照溶液主峰面积（310.767mAU.s），满足《中国药典（2020年版）》二部中对吲达帕胺限度的要求。