一步到位！Online SPE-二维液相色谱搞定维生素 A/D/E 同时检测- 大数跨境

悟空仪器

2025-09-17

背景

维生素是婴幼儿配方奶粉中的必需营养成分，对婴儿生长发育至关重要。依据国家标准《GB 10765-2021 食品安全国家标准婴幼儿配方食品》和《GB 10766-2021 食品安全国家标准较大婴儿配方食品》等的规定，婴幼儿配方奶粉中必须添加14种维生素，其中包括脂溶性维生素A、D、E。维生素A具有支持视力发育（如预防夜盲症）和免疫系统完善的功效；维生素D可促进钙吸收，强化骨骼发育；维生素E又名生育酚，是 α、β、γ 和 δ-生育酚等脂溶性维生素的总称，具有抗氧化作用，可保护细胞免受损伤。

本报告参考《T/SHFCA 002-2024 特殊医学用途配方食品中维生素A、D、E的测定在线固相萃取-二维液相色谱法》，采用在线固相萃取方法，使用悟空K2025二维液相色谱系统，同时测定婴幼儿配方奶粉中维生素A、D、E的含量。该方法摒弃了复杂的样品前处理步骤，在保证分析结果准确性的前提下，显著优化了样品分析流程，大幅提升了样品分析效率。

实验原理

试样经皂化后，皂化液经离心、过滤后注入二维液相色谱系统；试样通过在线固相萃取柱浓缩净化后，经一维色谱柱分离维生素A和维生素E（α、β、γ 和 δ-生育酚）；再通过中心切割，维生素D经阀切换、捕集后由二维色谱柱分离为维生素D₂和D₃。通过保留时间定性，外标法定量。

仪器配置与色谱条件

图1 悟空K2025二维液相色谱系统

图2 在线固相萃取-二维高效液相色谱法同时分析V_A、V_D、V_E阀切换示意图

表1 二维液相系统色谱条件

实验结果

图3 混合标准溶液连续进样6针叠加色谱图

注：1：VA；2：δ-VE；3：β-VE；4：γ-VE；5：α-VE；6：VD₂；7：VD₃

对V_A、V_D、V_E混合标准溶液进行测试及重复性考察（图3），三种维生素均具有极佳的峰形；如表2所示，β-VE和γ-VE的分离度为1.76，VD₂和VD₃的分离度为2.35，均可实现良好分离。如表3所示，三种维生素保留时间RSD均≤0.09 %，峰面积的RSD均≤0.72 %，具有良好的定性定量重复性。

标准品的V_A、V_D、V_E在其线性浓度范围内均呈现良好的线性关系，相关系数R均≥0.9999。

图4 婴幼儿配方奶粉样品一维和二维色谱图

注：1：VA；2：δ-VE；3：β-VE；4：γ-VE；5：α-VE；6：VD₂；7：VD₃

婴幼儿配方奶粉试样中V_A、V_D、V_E的含量范围为0.0 mg/100g~10 mg/100g；两次独立测定结果的相对偏差范围为-0.85 %~4.58 %，满足《T/SHFCA 002-2024 特殊医学用途配方食品中维生素A、D、E的测定在线固相萃取-二维液相色谱法》中规定的在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算数平均值的15%的要求；加标回收实验中， V_A、V_D、V_E的回收率范围为98.0 %~106.0 %。