前言
《GB/T 46804-2025 食品中磷脂酰丝氨酸的测定》是专门针对食品中磷脂酰丝氨酸（PS）的国家推荐性检测标准，填补了磷脂酰丝氨酸检测方法的国标空白，本标准于2026年7月1日正式实施。
本文参考《GB/T 46804-2025 食品中磷脂酰丝氨酸的测定》，悟空仪器使用实际样品进行全方位方法复核。
实验方案
原理
试样中磷脂酰丝氨酸经超声提取，固相萃取柱净化后，采用正相液相色谱法分离，使用蒸发光散射检测器（ELSD）检测，以保留时间定性，外标法定量。
样品
市售压片糖果、固体饮料、方便食品、凝胶糖果、奶粉
仪器配置
K2025高效液相色谱仪：K2025P2二元正相高压输液泵、K2025AS自动进样器、K2025CO柱温箱、K2025ELSD蒸发光散射检测器、Wookinglab色谱工作站；
色谱条件
色谱柱：Diol二醇基柱（4.6 mm×250 mm，5 µm），或者相当的色谱柱；
流动相：以正己烷-异丙醇-乙酸-三乙胺溶液为流动相A，以异丙醇-水-乙酸-三乙胺溶液为流动相B，按照下表进行梯度洗脱：
|
时间(min) |
流动相A(%) |
流动相B(%) |
|
0.0 |
95 |
5 |
|
8.0 |
60 |
40 |
|
17.0 |
40 |
60 |
|
17.1 |
0 |
100 |
|
20.0 |
0 |
100 |
|
20.1 |
95 |
5 |
|
22.0 |
95 |
5 |
流速：1.0 mL/min；
进样量：20 μL；
洗针液：三氯甲烷-甲醇溶液；
柱温：45℃；
检测器及参数：检测器为蒸发光散射检测器，气体流量为3.0 L/min，漂移管温度为80℃，雾化温度为80℃。
实验结果
重复性测试结果
按照色谱条件进行采集，磷脂酰丝氨酸标准溶液（浓度为100 μg/mL）的色谱图如图1所示，积分结果如表1所示。
图1 磷脂酰丝氨酸标准溶液的色谱图
表1 磷脂酰丝氨酸标准溶液色谱图积分结果表
|
目标物 |
保留时间 (min) |
峰面积 (mV.s) |
峰高 (mV) |
理论塔板数 |
分离度 |
对称/拖尾因子 |
|
磷脂酰丝氨酸 |
11.395 |
606.822 |
66.196 |
42130 |
- |
0.95 |
由表1中数据可知，磷脂酰丝氨酸的保留时间为11.395 min，理论塔板数为42130，拖尾因子为0.95，具有良好的峰形。
将磷脂酰丝氨酸标准溶液（浓度为100 μg/mL）连续进样6针，叠加的色谱图如图2所示，统计结果见表2。
图2 磷脂酰丝氨酸标准溶液（浓度为100 μg/mL）连续进样6针叠加的色谱图
表2 磷脂酰丝氨酸标准溶液（浓度为100 μg/mL）连续进样6针重复性数据统计表
|
目标物 |
磷脂酰丝氨酸 |
|
|
项目 |
保留时间 （min） |
峰面积 （mV.s） |
|
1 |
11.418 |
587.172 |
|
2 |
11.412 |
586.813 |
|
3 |
11.406 |
570.811 |
|
4 |
11.414 |
580.975 |
|
5 |
11.403 |
581.086 |
|
6 |
11.394 |
582.465 |
|
平均值 |
11.408 |
581.554 |
|
RSD% |
0.08 |
1.02 |
由表2中数据可知，磷脂酰丝氨酸标准溶液（浓度为100 μg/mL）连续进样6针进行重复性测试，磷脂酰丝氨酸保留时间的RSD为0.08%，峰面积的RSD为1.02%，具有良好的定性定量重复性。
含量测定结果
按照色谱条件，对试样溶液和试样加标溶液进行采集，试样溶液和试样加标溶液的色谱图如图3~图12所示。试样中磷脂酰丝氨酸的含量计算结果如表3所示。
压片糖果试样
图3 压片糖果试样溶液的色谱图
图4 压片糖果试样加标溶液的色谱图
固体饮料试样
图5 固体饮料试样溶液的色谱图
图6 固体饮料试样加标溶液的色谱图
方便食品试样
图7 方便食品试样溶液的色谱图
图8 方便食品试样加标溶液的色谱图
凝胶糖果试样
图9 凝胶糖果试样溶液的色谱图
图10 凝胶糖果试样加标溶液的色谱图
奶粉试样
图11 奶粉试样溶液的色谱图
图12 奶粉试样加标溶液的色谱图
表3 试样中磷脂酰丝氨酸含量计算结果表
|
试样 |
含量1 （mg/100g） |
含量2 （mg/100g） |
含量 均值 （mg/100g） |
相对 偏差 （%） |
加标 回收率 （%） |
|
压片糖果 |
0 |
0 |
0 |
0 |
95.9 |
|
固体饮料 |
0 |
0 |
0 |
0 |
92.1 |
|
方便食品 |
336.3 |
335.2 |
335.7 |
0.3 |
99.4 |
|
凝胶糖果 |
0 |
0 |
0 |
0 |
101.3 |
|
奶粉 |
0 |
0 |
0 |
0 |
100.5 |
经计算，压片糖果、固体饮料、凝胶糖果和奶粉试样中未检出磷脂酰丝氨酸，方便食品试样中磷脂酰丝氨酸的含量为335.7 mg/100g，在重复性条件下获得的两次独立测定试样含量的偏差为0.3%，满足《GB/T 46804-2025 食品中磷脂酰丝氨酸的测定》中规定的该值不超过10%的要求；加标回收实验中，压片糖果、固体饮料、方便食品、凝胶糖果和奶粉试样的加标回收率分别为95.9%、92.1%、99.4%、101.3%和100.5%。
结论
本文使用悟空K2025高效液相色谱仪，采用正相色谱系统，以正己烷-异丙醇-乙酸-三乙胺溶液和异丙醇-水-乙酸-三乙胺溶液为流动相，进行梯度洗脱，配置蒸发光散射检测器，测定食品中磷脂酰丝氨酸的含量。实验结果表明：
1
磷脂酰丝氨酸的保留时间为11.395 min，理论塔板数为42130，拖尾因子为0.95，具有良好的峰形；
2
磷脂酰丝氨酸标准溶液（浓度为100 μg/mL）连续进样6针进行重复性测试，磷脂酰丝氨酸保留时间的RSD为0.08%，峰面积的RSD为1.02%，具有良好的定性定量重复性；
3
压片糖果、固体饮料、凝胶糖果和奶粉试样中未检出磷脂酰丝氨酸，方便食品试样中磷脂酰丝氨酸的含量为335.7 mg/100g，在重复性条件下获得的两次独立测定试样含量的偏差为0.3%，满足《GB/T 46804-2025 食品中磷脂酰丝氨酸的测定》中规定的该值不超过10%的要求；加标回收实验中，压片糖果、固体饮料、方便食品、凝胶糖果和奶粉试样的加标回收率分别为95.9%、92.1%、99.4%、101.3%和100.5%。
因此，悟空K2025高效液相色谱仪配置蒸发光散射检测器，可以满足《GB/T 46804-2025 食品中磷脂酰丝氨酸的测定》中对食品中磷脂酰丝氨酸含量测定的需求。
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