逍鹏讲堂 /
血清出现沉淀现象是怎么回事？
#1
血清是什么？
The World Earth Day
#2
血清沉淀是什么？
XP Biomed x VivaCell
纤维蛋白（Fibrin）
血清中肉眼可见的沉淀物大多属于这一类型。由于在生产过程中，血清采集、过滤(3次0.1μm过滤）和灌装处理都是在低温条件下快速完成, 此时血清中纤维蛋白原处于溶解状态。但在解冻之后, 血清中纤维蛋白原往往会发生凝集形成肉眼可见的沉淀。
磷酸钙（Calcium Phosphate）
常见的一种沉淀物，会造成血清浑浊，并且在37℃培养的时候会增加。这种沉淀物在倒置显微镜下观察像小黑点，并且由于布朗运动看上去像在活动，因此经常被误认为是微生物污染。
其他成分（Other）
血清中的其他成分也会形成沉淀，例如胆固醇和其他蛋白沉淀等。
#3
血清产生沉淀的机理
XP Biomed x VivaCell
01
血清沉淀的形成机理多种多样，具体的机理尚不十分明确。
02
血清沉淀的多少与血清质量不成正比。如有血清沉淀产生，不必担忧，通常若想去除沉淀，我们建议您采用2000 rpm离心5 min，去除大颗粒沉淀，取上清液使用即可。
03
血清不建议过滤后使用，过滤可能会导致血清中部分营养成分的流失。
#4
血清沉淀是污染吗？
XP Biomed x VivaCell
前面提到过磷酸钙在倒置显微镜下像小幅振动的小黑点，容易被误认为是微生物污染，但其实血清沉淀并不是污染。
由于在37℃的温度下培养，会加剧磷酸钙颗粒产生，故空培血清验证污染的方法也不太合理。
我们可以通过将血清接种在细菌培养基上进行培养，观察是否存在细菌增殖，并且进行革兰氏染色，观察判断是否为微生物污染。
#5
血清沉淀会影响细胞生长吗？
XP Biomed x VivaCell
#6
如何避免沉淀出现？
XP Biomed x VivaCell
正确的解冻方法
01
应按照逐步解冻的方式正确解冻血清：从-20℃取出后，置于4℃冰箱缓慢解冻，最后置于室温完成解冻。
02
在解冻过程中，请注意时不时缓慢摇晃瓶子，减少沉淀的产生。
03
为避免反复冻融，建议您将血清分装使用。
04
直接室温或者水浴溶解均易造成沉淀增多。
#7
正确使用和保存
XP Biomed x VivaCell
非必须不用热灭活（热灭活会使血清中部分蛋白质变性析出，影响血清品质）；
不宜37℃预热，血清和完全培养基通常室温预热即可；
避免反复冻融；
避免紫外线照射；
避免2-8℃长期保存，分装后-20℃长期保存，按需溶解。
#8
总结
XP Biomed x VivaCell
本期的希尔博士学堂结束了，我们下期再见！
• 往期精选
