Phos-tag™ 是一种能与磷酸离子特异性结合的功能分子,可与蛋白上的磷酸基团结合。在SDS-PAGE中,在有二价金属离子(Mn2+/Zn2+)参与的条件下,磷酸化蛋白与Phos-tag™ 结合,电泳迁移速度变慢,从而与非磷酸化蛋白分离。 FUJIFILM Wako推出了即开即用型的SuperSep™ Phos-tag™ 预制胶,含有50 μmol/L的Phos-tag™ 丙烯酰胺,含有Zn2+作为金属离子,保存稳定性长达半年,得到的条带整齐。多种规格型号,适合Bio-rad/Life Technolofies/EasySeperator等多种电泳仪。全批次均经过严格检验,保证能分离磷酸化与非磷酸化条带。 ◆应用实例 β-casein使用Tris-甘氨酸(TG),Tris-Tricine(TT)或Tris-MOPS(TM)三种不同runningbuffer比较β-casein在SuperSepTMPhos-tagTM预制胶中磷酸化蛋白的迁移率。Kinoshita-Kikuta, E.,Kinoshita, E., & Koike, T. (2012). A laborsaving, timesaving, and morereliable strategy for separation of low-molecular-mass phosphoproteins inPhos-tag affinity electrophoresis. International Journal of Chemistry, 4(5),1. 鼠脑来源Dnmt1磷酸化实验从鼠脑提取液中纯化得到GST-Dnmt1(1-290)结合蛋白,作为体外激酶实验的反应底物,在SuperSep™ Phos-tag™ 预制胶中检测到了激酶的存在。The DNA-binding activity of mouse DNA methyltransferase 1 is regulatedby phosphorylation with casein kinase 1delta/epsilon. Y. Sugiyama, N. Hatano,N. Sueyoshi, I. Suetake, S. Tajima, E. Kinoshita, E. Kinoshita-Kikuta, T.Koike, and I. Kameshita, Biochem. J.,二维电泳分析hnRNP K磷酸化异构体小鼠巨噬细胞J774.1 经LPS 刺激后,裂解细胞,经过免疫沉淀法分离得到hnRNP K。在二维电泳中,一维是IPG 胶,二维是SuperSep™ Phos-tag™ 预制胶,可分离hnRNP K 的异构体。利用质谱仪确认不同的点代表不同的亚型或修饰蛋白。Characterization of multiple alternative forms of heterogeneousnuclear ribonucleoprotein K by phosphate-affinity electrophoresis. Y. Kimura,K. Nagata, N Suzuki, R. Yokoyama, Y. Yamanaka, H. Kitamura, H. Hirano, and O.Ohara, Proteomics, Nov 2010; 10(21): 3884-95. ◆产品列表 匹配Mini-PROTEAN® Tetra Cell电泳仪(Bio-Rad Laboratories, Inc.) 匹配XCell SureLock® Mini-Cell电泳仪(Life Technologies, Inc.) 匹配Wako EasySeparator电泳仪(产品编号058-07681) ◆相关产品 ※ 仅供实验使用,不可用于临床诊断。