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如何选择PCR耗材?

如何选择PCR耗材? 基因快讯
2022-01-07
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导读:如何选择PCR耗材,内有干货!

PCR实验小调查

(全国卷)

考试规则:点击你认为正确的选项

下列影响PCR实验结果的因素有哪些?

A. 模板DNA/RNA质量

回答正确

解析:模板提取质量的好坏和实验结果息息相关。模板不纯可能会抑制PCR实验的进行;模板浓度过低,扩增得率会较低;模板片段化严重则可能目的基因扩增失败。

B. 引物设计

回答正确 ✔

解析:PCR实验中,引物就像一个靶子,起到定位引导的作用,引物设计不好,自然扩增不出来产物或非特异性扩增较多。

C. 聚合酶/mix

回答正确 

解析:引物起到靶标引导的作用之后,酶的选择则直接关系到扩增的效率,产量等。

D. PCR耗材

回答正确 

解析:你们都选择这一项了吗?

点击答题丨点击选项查看对错

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影响一个PCR实验成败的关键因素有哪些呢?我们中的大部分都能想到提取的DNA/RNA质量、反转录的效率、引物的特异性乃至DNA聚合酶的保真度、扩增长度等问题,但大家都想到耗材了吗?选择合适的耗材也会助力您的实验成功。而关于PCR实验耗材我们改如何选择呢?


首先需要明确的是我们做的是哪种PCR实验。根据检测方法的不同,PCR实验分为普通PCR法和荧光定量PCR法,前者一般是终点PCR跑胶法测定,所以在选择耗材时需要关注的主要是耗材本身的导热性和密封性;而后者是实时检测荧光信号,除了导热性和密封性外,对透光性和避光性也有所要求。换句话而言,可以做荧光定量PCR的耗材一定可以来做普通PCR,反之,效果却会差很多!


确定好了实验类型,我们就可以选择耗材了,如前面所述,我们知道了密封性、导热性、透光性、避光性等因素是我们需要关注的,那为什么要关注这些呢?

密封性

密封性越好,产物的挥发越少,得到的产物就越多同时气溶胶的产生也越少,对于下一轮实验的污染也就越少,也就意味着假阳性的产生率越低。

导热性

导热性越好越均一,PCR的速度就越快,准确度也越高。

透光性

如果仅做终点跑胶法,可自动忽略以下两点。荧光定量是一种实时定量的方式,那么耗材本身的透光性就直接关系到我们检测到的荧光信号多少,如果选择耗材透光性不足,本该检测到的信号检测不到,那就会造成我们对结果的误判。

避光性

同上面的因素,如果我们在整个实验过程中没注意避光,带有荧光的试剂过度被消耗,那最直接就会影响我们实验的扩增效率,导致不准确的结果产生。

基因有限公司提供的GENEPLASTIX系列实验室耗材全线产品均是在十万级净化车间注射成型及装配,除了确保无DNase、无RNase、无热源外,在密封性、导热性、透光性、避光性等方面都在市面上表现比较优异。

采用独特的一次注塑成型技术,超薄设计,热传导快,视窗比平面低,不易被划擦,管子密封性更好,近乎零蒸发,减少了气溶胶的污染,最大程度避免了假阳性的产生。荧光系列,盖子高度透光,可适用于顶读与底读。

PCR单管

低于平面的高透视窗设计,可以最大程度避免被划擦。100%进口的原材料的使用使得管壁具有均一的平整和稳定的不黏壁性,确保了样品处理和吸取时的精准度。

八联管(适用普通PCR)

不同于市面上其他厂家底部注塑的方式,GENEPLASTIX的注塑点是在板面上的孔与孔的交叉处,这样使得PCR板的管底与PCR仪的接触更好,同时采用纯度高达99.9%的聚丙烯,超薄设计、壁厚一致均匀的工艺使得热传导精确、控温准确、有效减少了实验循环时间。

PCR板

部分产品适配表

基因有限公司作为一家专门的生物试剂仪器供应商,除了以上PCR耗材外,我们配套的还包括封板膜(适用PCR和qPCR检测)、吸头、核酸提取和分子酶等产品。我们希望通过不懈的努力,为您提供更好,更专业的产品和服务,为您的成功铺路搭桥!


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基因生物技术国际贸易(上海)有限公司拥有仪器,试剂,市场与技术支持,售后等各部门组成的完整体系,是国内生命科学领域主要供应商之一,代理国际一流的高科技产品。积极利用公众号,进行最新资讯的共享,希望得到您的关注和支持。
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