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众里寻他千百度--激光显微操作之二

众里寻他千百度--激光显微操作之二 基因快讯
2014-05-05
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导读: 2-2目的细胞的筛选显微切割初步的筛选细胞的方法就是依据特定的细胞形态来进行切割,这样的筛选方法显然不是十

2-2目的细胞的筛选

显微切割初步的筛选细胞的方法就是依据特定的细胞形态来进行切割,这样的筛选方法显然不是十分准确的,挑选的细胞就很容易掺杂非同质细胞,影响实验的准确性,所以往往需要在显微操作精细度保证的前提下,对所需目标细胞进行细致筛选,才能保证我们最终获得信息的可靠性、真实性、特异性,从而实现显微操作获取细胞的真正目的。
2-2-1 未染色样本切割

对样品(多为切片)进行染色,可以准确判别目标细胞,这样保证了获取材料的均一性同质性,但染色过程难免会由于时间、染料、人为操作等多种因素造成样本的污染及破坏,这样采集的显微切割目标样本不利于下游实验。那么如何取材才能获趋利避害?

对组织进行连续切片操作,选中相邻三张切片中的一张进行染色及切割区域的选定(将其作为下一步激光在未染色切片上游走的坐标地图),然后软件将其作为模板,自动、准确地在标记出的区域上,精准地整合在未染色的切片中并进行切割,其精准度不受切片的形状、铺片角度和位置的改变的影响,这样不但避免染色对样本可能造成的影响,还节省了大量的时间和成本(图2-1)。

2-1 对未染色样本切割

2-2-2 荧光标记筛选

有些实验需要对样品进行荧光标记,被抗体特异标记的细胞即为目的细胞,提升了获取均一细胞的精准性,系统提供的荧光模块,可以对免疫荧光组织及细胞进行选定切割(即将显微镜升级为荧光观测功能),其荧光通路完全独立于激光通路,系统的所有切割功能都不影响显微镜的独立正常使用。

2-2-3 软件识别(CellExplorer

软件可根据设定的细胞大小、形态、荧光标记等自动识别、标记样品中的靶细胞,并给出建议的切割路径,并可对系统设定后的路径进行调整使路径更加精确(图2-2)。基于形态学及荧光标记等,让计算机智能的筛选出目的细胞。

2-2 软件对细胞的识别

2-2-4 分类采集(Multi模块)

系统不但可以对一个样本中的不同类型细胞进行分别采集(图2-3 8连管适配器),还可以对多个样本中的同一类细胞进行集中采集(图2-4位载玻片平台),极大地提高了采集效率及准确性。其中对于不同类型细胞的一次性采集,可以用不同的颜色对不同类型细胞分别选择标记(图2-5,软件标记),软件会自动的识别并分别采集到不同的管内。

2-3 MultCap模块

2-4 MultiSlide 模块

2-5 软件标记多种类型细胞

稍候待续,更多内容请见“众里寻他千百度-激光显微操作之三”

【声明】内容源于网络
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